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測定抗原或抗體方法中的三個必要條件：
（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑。
（2）酶標記的抗原或抗體，稱為"結合物"(conjugate)。
（3）酶反應的底物，根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不類型的檢測方法。
 

ELISA試劑盒直接法和間接法優(yōu)缺點比較：
1、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。
1）優(yōu)勢：操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。
2）缺點：試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。
2、間接法：此測定方法與直接法類似，差別在于一級抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
1）優(yōu)勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析，不加酶標記的一級抗體則能保留它多的免疫反應性。
2）缺點：交互反應發(fā)生的機率較高。

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