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在蛋白表達(dá)分析、Western Blot實驗以及核酸檢測等分子生物學(xué)研究中,化學(xué)發(fā)光成像儀已經(jīng)成為實驗室的重要設(shè)備。隨著實驗對檢測靈敏度、圖像質(zhì)量和操作效率要求不斷提高,新一代化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)逐漸向智能化、一體化、高靈敏方向發(fā)展。那么,一臺性能優(yōu)秀的化學(xué)發(fā)光成像設(shè)備,其核心技術(shù)究竟體現(xiàn)在哪些方面?
化學(xué)發(fā)光成像技術(shù)利用目標(biāo)物與化學(xué)發(fā)光試劑發(fā)生特異性結(jié)合,在加入發(fā)光底物后,通過氧化還原或酶促催化反應(yīng)產(chǎn)生光信號。
與普通光學(xué)成像不同,整個檢測過程無需激發(fā)光源,而是依靠深度制冷CMOS相機(jī)直接捕獲微弱發(fā)光信號。由于發(fā)光強(qiáng)度與目標(biāo)蛋白、核酸或抗原抗體含量呈正相關(guān),因此能夠?qū)崿F(xiàn)高靈敏、低背景的定量分析,廣泛應(yīng)用于Western Blot、Southern Blot、Northern Blot、斑點(diǎn)雜交及酶活檢測等實驗。
對于化學(xué)發(fā)光成像儀而言,相機(jī)性能直接影響檢測結(jié)果。
參考資料中的YP-CL系列采用900萬像素深度制冷CMOS相機(jī),相機(jī)有效面積11.28mm×11.28mm,16bit灰度輸出(65536灰度值),暗電流小于0.0005e-/p/s,并可實現(xiàn)室溫22℃條件下-25℃制冷。
與此同時,系統(tǒng)支持1×1 Bin至8×8 Bin多級像素合并模式,可根據(jù)實驗需求兼顧高分辨率成像與弱信號增強(qiáng)能力,使微弱蛋白條帶仍能保持較好的成像質(zhì)量。
除了相機(jī)之外,鏡頭也是影響檢測效果的重要組成部分。
YP-CL系列配置F0.95大光圈鏡頭,在400~900nm波段透過率達(dá)到85%以上,可有效減少光信號損失,避免弱發(fā)光信號衰減。
相機(jī)16000:1動態(tài)范圍配合高透光鏡頭,可兼顧強(qiáng)信號與弱信號采集,避免實驗過程中亮帶過曝、弱帶缺失的問題,提高整體圖像質(zhì)量。
傳統(tǒng)成像設(shè)備通常需要實驗人員反復(fù)調(diào)整曝光時間。
資料顯示,該系列設(shè)備內(nèi)置智能曝光算法,可自動識別發(fā)光信號強(qiáng)弱,并推薦最佳曝光時間,同時支持過曝區(qū)域自動標(biāo)記。
這種設(shè)計能夠減少人工調(diào)節(jié)次數(shù),提高重復(fù)實驗的一致性,也有助于提升實驗效率。
新一代一體式化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)最大的變化之一,就是將計算、采集、控制集成于設(shè)備內(nèi)部。
YP-CL-2與YP-CL-4均采用無電腦一體式設(shè)計,搭載15.6英寸高清電容觸摸屏,可直接完成實驗采集、參數(shù)設(shè)置、圖像處理及數(shù)據(jù)導(dǎo)出,無需額外連接電腦即可完成整個實驗流程。
同時,系統(tǒng)預(yù)置多種實驗?zāi)0?,支持參?shù)一鍵調(diào)用,即使初次使用,也能夠快速完成實驗設(shè)置。
實驗完成后,圖像質(zhì)量直接關(guān)系后續(xù)分析結(jié)果。
參考資料顯示,該系統(tǒng)內(nèi)置專業(yè)圖像處理軟件,可完成圖像旋轉(zhuǎn)、裁剪、拼接以及亮度、對比度調(diào)節(jié),使實驗圖像保持最佳分析狀態(tài),為后續(xù)定量分析提供可靠數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
不少用戶容易混淆化學(xué)發(fā)光成像儀與化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。
從參考資料來看,兩者主要區(qū)別在于應(yīng)用范圍。
YP-CL-2屬于單一化學(xué)發(fā)光模式,主要適用于Western Blot等化學(xué)發(fā)光實驗,可完成化學(xué)發(fā)光信號采集與定量分析。
而YP-CL-4則屬于化學(xué)發(fā)光熒光成像系統(tǒng)的一體化擴(kuò)展方案,在化學(xué)發(fā)光功能基礎(chǔ)上,進(jìn)一步集成蛋白凝膠成像、核酸凝膠成像以及切膠系統(tǒng)。
其中:
· 支持DNA/RNA瓊脂糖凝膠電泳成像;
· 支持考馬斯亮藍(lán)、銀染蛋白凝膠檢測;
· 配備302nm紫外透射光源及590nm窄帶濾光片;
· 集成紫外、白光、化學(xué)發(fā)光三種拍攝模式,可覆蓋更多實驗場景。
對于同時開展蛋白和核酸實驗的實驗室而言,一體化系統(tǒng)能夠減少設(shè)備配置,提高實驗效率。
除了產(chǎn)品性能外,設(shè)備制造企業(yè)的研發(fā)能力和質(zhì)量管理體系同樣值得關(guān)注。
參考資料顯示,企業(yè)已獲得高新技術(shù)企業(yè)(編號GR202537003143)認(rèn)定,并建立了齊全的質(zhì)量管理體系,擁有質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(注冊號:78323Q0302R0S)、環(huán)境管理體系認(rèn)證證書(注冊號:78323E0155R0S)及職業(yè)健康安全管理體系認(rèn)證證書(編號:78323S0146R0S)。同時,還取得企業(yè)信用等級、企業(yè)資信等級、重服務(wù)守信用單位等多項資質(zhì)認(rèn)證,并具備輻射安全許可證(魯環(huán)輻證[G0381]),為產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)及服務(wù)提供了較齊全的管理保障。
從檢測原理來看,化學(xué)發(fā)光成像儀的核心技術(shù)主要體現(xiàn)在深度制冷CMOS相機(jī)、高透光鏡頭、智能曝光算法以及一體化操作平臺等方面。對于僅開展Western Blot實驗的用戶,可選擇專注化學(xué)發(fā)光檢測的一體式設(shè)備;若實驗涉及蛋白、核酸及凝膠成像,則化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)能夠覆蓋更多應(yīng)用場景。結(jié)合實驗內(nèi)容、檢測需求及功能配置進(jìn)行選型,更有助于提升實驗效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量。

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