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使用不同類型液相色譜柱的優(yōu)缺點(diǎn)

閱讀:97發(fā)布時(shí)間:2025-7-24


  高效液相色譜(HPLC)和超高效液相色譜(UHLPC)是兩種的液相色譜技術(shù)。高效液相色譜和UHPLC有一個(gè)填充在色譜柱中的固定相,液體流動(dòng)相通過色譜柱。感興趣的組分根據(jù)極性進(jìn)行分離,選擇的色譜柱和流動(dòng)相取決于用于分析的色譜方法。
       
  根據(jù)填料和顆粒技術(shù),HPLC和UHLPC色譜柱可分為不同的類別。根據(jù)要分離分析的內(nèi)容,每個(gè)列類別都有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。


  全孔色譜柱


  多孔球形二氧化硅顆粒廣泛用于高效液相色譜和UHPLC。多孔顆粒像海綿一樣工作,當(dāng)它們與固定相相互作用并導(dǎo)致分離時(shí),樣品擴(kuò)散進(jìn)出孔隙。

  使用全多孔色譜柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是:


  優(yōu)勢


  提供多種固定相。
  高機(jī)械強(qiáng)度
  良好效率
  適用于較高的pH值


  劣勢


  二氧化硅在pH  7.5以上的溶解度
  pH值小于1.5時(shí)鍵的水解
  殘留的硅烷醇活性將導(dǎo)致峰拖尾。
  多孔色譜柱的一些缺點(diǎn)可以通過改性來克服。硅氧烷橋可以被硅氧烷橋如乙烷鍵取代,以延長色譜柱在較高pH值下的使用壽命。


  核殼柱


  核殼色譜柱包含核殼顆粒,也稱為表面多孔顆粒。色譜柱具有內(nèi)部固體二氧化硅不可滲透的核心,該核心被形成外殼的外部二氧化硅多孔層包圍。多孔顆粒和核殼顆粒之間的一個(gè)很大的區(qū)別是擴(kuò)散僅發(fā)生在顆粒的多孔外層,而不是整個(gè)顆粒。


  使用核殼色譜柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是:


  優(yōu)點(diǎn)


  柱長,柱效更高。
  快速分析時(shí)間
  與全多孔顆粒相比,靈敏度更高。


  劣勢


  方法轉(zhuǎn)移可能很耗時(shí)。
  需要能在高壓下工作的特殊儀器。


  整體柱


  種色譜柱是整體柱。整體式色譜柱由單個(gè)多孔硅膠或有機(jī)聚合物制成,而不是許多小硅膠顆粒。單棒具有明確的中孔和大孔結(jié)構(gòu)。大孔類似于顆粒填充柱的間隙體積。大孔決定了柱子的滲透性。整體柱的中孔位于二氧化硅顆粒的表面或二氧化硅骨架中。

  使用整體柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是:


  優(yōu)勢

  高孔隙率導(dǎo)致低壓
  只需要少量的樣品制備。
  微孔結(jié)構(gòu)可以直接注射。
  適用于臟樣品。
  不會(huì)因?yàn)閾Q床而不穩(wěn)定。


  劣勢


  可用的固定相不多
  不如全多孔色譜柱有效。
  存在已知的再現(xiàn)性問題。


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