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細(xì)胞培養(yǎng)Z大的優(yōu)勢(shì)是什么?

時(shí)間:2018/4/3閱讀:323
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細(xì)胞培養(yǎng)與單層細(xì)胞培養(yǎng)相比有很多優(yōu)點(diǎn)。其中大的優(yōu)勢(shì)是,傳代時(shí)只需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行稀釋即可,由于不存在蛋白水解酶、機(jī)械力等造成的創(chuàng)傷,傳代后基本不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)速率。此外,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞能充分利用培養(yǎng)空間,而且能夠非常直觀觀察到細(xì)胞規(guī)模擴(kuò)大。細(xì)胞可以在類(lèi)似于培養(yǎng)酵母菌或細(xì)菌的發(fā)酵罐樣的生物反應(yīng)器內(nèi)大規(guī)模擴(kuò)增。
根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型不同,懸浮培養(yǎng)的接種密度通常介于2× 104 cells/ml到5 × 105 cells/ml之間,有些細(xì)胞甚至可以達(dá)到2 x 106 cells/ml。如果細(xì)胞接種密度過(guò)低,他們將經(jīng)歷一個(gè)生長(zhǎng)停滯期,細(xì)胞生長(zhǎng)十分緩慢甚至全部死亡。但是如果接種密度過(guò)高的話,細(xì)胞會(huì)很快將培養(yǎng)基內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分耗竭,然后突然死亡。請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)了解推薦接種密度、傳代比例、培養(yǎng)基更換時(shí)間表以及推薦使用的培養(yǎng)基等具體信息。
懸浮培養(yǎng)細(xì)胞傳代步驟:
1.事先將*培養(yǎng)基自冰箱內(nèi)拿出,平衡至室溫。
 
2.使用移液槍吹打重懸培養(yǎng)在靜置培養(yǎng)容器內(nèi)的細(xì)胞,使細(xì)胞懸液充分混勻。取適量細(xì)胞懸液用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算細(xì)胞密度。
 
3. 根據(jù)說(shuō)明書(shū)推薦的低接種密度及步驟2算出的細(xì)胞密度,計(jì)算需要接種到新培養(yǎng)容器內(nèi)的細(xì)胞懸液體積以及需要加入的新鮮培養(yǎng)基的量。
 
4. 在新的培養(yǎng)容器內(nèi)加入步驟3計(jì)算出的所需添加的新鮮培養(yǎng)基及細(xì)胞懸液。如有必要,可在培養(yǎng)容器內(nèi)充滿(mǎn)無(wú)菌過(guò)濾的CO2,封好培養(yǎng)容器并置于合適的溫度下孵育培養(yǎng)。
 
5. 通常情況下,細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)不需要每次都*更換成新的培養(yǎng)基,除非細(xì)胞密度非常高或者是培養(yǎng)基的pH偏酸性(培養(yǎng)基顏色偏黃)。如需*更換培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液在125g離心力下離心10 min,吸棄舊培養(yǎng)基,然后使用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
含量測(cè)定    百秋李醇    對(duì)照品    110772-200404        30mg
含量測(cè)定    阿魏酸    對(duì)照品    110773-9910        50mg
含量測(cè)定    青藤堿    對(duì)照品    110774-200507        20mg
含量測(cè)定    胡椒堿    對(duì)照品    110775-200203        20mg
含量測(cè)定    香草酸    對(duì)照品    110776-200402        50mg
含量測(cè)定    柴胡皂苷a    對(duì)照品    110777-200405        20mg
含量測(cè)定    柴胡皂苷d    對(duì)照品    110778-200404        20mg
含量測(cè)定    氧化*    對(duì)照品    110780-200405        20mg
含量測(cè)定    黃芪甲苷    對(duì)照品    110781-200512        20mg
細(xì)胞培養(yǎng)

 

 

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