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如何選擇液相色譜儀流動相

閱讀:86發(fā)布時間:2025-3-24

一、選擇流動相應(yīng)該考慮哪些方面
一個性能******的液相色譜流動相溶劑需要具有粘度低,檢測器兼容性好,容易得到純品和低毒性等特征。


選擇流動相的時候需要考慮下面幾個方面、


1、選擇的流動相不應(yīng)該改變?nèi)魏翁盍闲再|(zhì)


低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。


2、純度


色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。


3、必須與檢測器匹配


使用UV檢測器時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收,或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時,應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。 


4、粘度要低(應(yīng)<2cp):


高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長,******選擇沸點在100℃以下的流動相。


5、對樣品的溶解度要適宜


如果溶解度欠佳,樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。


6、樣品可以很好的發(fā)揮回收作用


應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑


二、選擇流動相的幾點秘訣


1、從高到低


一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗,這樣可以很快地得到分離結(jié)果,然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。


2、倍數(shù)翻倍規(guī)則


每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中,注意觀察各個峰的分離情況。


3、粗的變成細(xì)的,慢慢調(diào)整。
當(dāng)樣品的分離達(dá)到一定的條件時。,需要把郵寄溶劑從百分之10調(diào)整到百分之5.并且慢慢下調(diào)。直到各個組分在分離的情況下不在改變。


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