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液相色譜柱的選擇問題

閱讀：72發(fā)布時(shí)間：2025-3-24

假如要測試把一樣的組分需要用到多個(gè)液相色譜柱不？列如：需要測試的基本樣品有木糖,木二糖，甘露糖，半乳糖等等都是糖類的樣品。測試這些樣品是不是每一種都需要一個(gè)液相色譜柱來進(jìn)行測試？
答：其實(shí)不一定。每一個(gè)樣品的組分都是不同的。沒有規(guī)定過不一樣的組分需要用到不一樣的液相色譜柱，樣品測試的極性比較大的。列如。涉及到每個(gè)組分采用的不一樣的極性或者手性色譜柱的話，這個(gè)條件下是不可以采用同一條件的。還有，測試木糖,木二糖，甘露糖，半乳糖等等都是糖類樣品的時(shí)候，看一下你需要的綜合條件是不是都是同一個(gè)條件來測定，。如果測試的差別不是很大的話。比如常規(guī)的色譜柱選擇，波長等測試條件都相同的話。我們是可以考慮用同一跟液相色譜柱來進(jìn)行測試的。

再教一種網(wǎng)上都采用的方法;
HPLC中常用色譜柱
方法色譜柱說明
反相和離子對色譜法 C18 耐用，高保留
C8 相似于C18，但保留略低
C3，C4 保留較弱，多用于蛋白，多肽
Phenyl,Phenylethyl 中等保留，與C18有某些不同的選擇性
CN(cyano) 中等保留，可用于正相和反相色譜柱
NH2(amino) 弱保留，用于糖類分離，較不穩(wěn)定
聚苯乙烯流動(dòng)相PH1~13均穩(wěn)定，柱壽命長
正相色譜柱 CN(cyano) 耐用，中等極性
OH(diol) 極性較CN強(qiáng)
NH2(amino) 高極性，較不穩(wěn)定
硅膠耐用，價(jià)廉，操作較不方便
分子排阻色譜法硅膠耐用，有吸附性
硅烷化硅膠較少吸附，溶劑匹配性好，可用有機(jī)溶劑
OH(diol) 較不穩(wěn)定，用于水溶液SEC（GFC）
聚苯乙烯廣泛用于有機(jī)溶劑SEC（GPC），通常與水或高極性有機(jī)溶劑不匹配
離子交換色譜法鍵合相較不穩(wěn)定，重現(xiàn)性較差
聚合物離子交換樹脂穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，柱效較低

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