除非特殊說明，在所有情況下，所用溶劑的體積應(yīng)該是色譜柱體積的 40-60 倍。應(yīng)在清洗過程開始和結(jié)束時各測一次柱效和容量因子等，比較色譜柱性能的改善，以確定清洗的效果。確保色譜柱中沒有樣品和緩沖溶液，清洗前所用的溶劑應(yīng)與***初清洗時所用的溶劑相溶。
應(yīng)確保
液相色譜儀實(shí)驗(yàn)測試時所用的流動相與色譜柱中***后的溶劑相溶。
1 正相填料
用*沖洗。
用甲醇沖洗。
用*沖洗。
二氯甲烷沖洗。
用無苯正己烷沖洗。
2 反相填料
用 HPLC 級水沖洗，沖洗時進(jìn) 4 等份的 200μl 的二甲亞砜（DMSO）。
用甲醇沖洗。
用氯仿沖洗。
用甲醇沖洗。
3 陰離子交換填料
用 HPLC 級水沖洗。
用甲醇沖洗。
用氯仿沖洗。
4 陽離子交換填料
用 HPLC 級水沖洗；在沖洗的過程中進(jìn) 4 等份 200μl 的 DMSO
*沖洗。
5 蛋白質(zhì)凝膠過濾填料
去除蛋白質(zhì)尺寸排阻介質(zhì)中的污染物有兩種清洗/再生的方法。
弱保留蛋白質(zhì)
用 30moL/L pH3.0 磷酸鹽緩沖液沖洗。
強(qiáng)保留蛋白質(zhì)
用 ****的水到 ****的乙腈梯度洗脫 60min。
6 多孔石墨化碳
多孔石墨碳有四種再生的方法，選用哪一種方法依賴于被分析物和所用的溶劑。
酸堿再生
適合于使用極性流動相分析離子類分析物。
將液相色譜儀色譜柱倒裝
用 50ml 含 0.1%三的*／水(1:1)溶液 1ml/min 流速沖冼。
用 50ml 含 0.1%三乙胺或*的*／水(1:1)溶液 1ml/min 流速沖冼。
再用 50ml 含 0.1%三的*／水(1:1)溶液 1ml/min 流速沖冼。
再用 95%甲醇水溶液沖洗重新平衡。
將液相色譜儀色譜柱改為正向。
強(qiáng)有機(jī)溶劑再生
適合于水相分析極性或離子類分析物。
用 50ml 丙酮以 1ml/min 流速沖洗。
用 120ml 二丁醚以 1ml/min 流速沖洗。
再用 50ml 丙酮以 1ml/min 流速沖洗。
用水沖冼至平衡。
正相色譜柱再生
適合于主要使用正相流動相的多孔石墨化碳柱。
用 50ml 二氯甲烷以 1ml/min 流速沖洗。
用 50ml 甲醇以 1ml/min 流速沖洗。
用 50ml 水以 1ml/min 流速沖洗。
用 50ml 0.1mol/L 鹽酸以 1ml/min 流速沖洗。
再用 50ml 水以流速 1ml/min 沖洗。
再用 50ml 甲醇以 1ml/min 流速沖洗。
再用 50ml 二氯甲烷以 1ml/min 流速沖洗。
***后用流動相沖冼至平衡。
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