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閱讀：482發(fā)布時(shí)間：2022-8-20
Zenix-C SEC色譜柱在胰島素分析上的應(yīng)用
?背景介紹
?不同來源的胰島素樣品分析
?Zenix-C SEC-80色譜柱特點(diǎn)及訂購(gòu)信息
胰島素-攻克糖尿病的有力
?胰島素：其氨基酸序列在動(dòng)物間具有高度的保守性。與人胰島素相比，牛胰島素中有3個(gè)氨基酸不同，而豬胰島素中僅有1個(gè)氨基酸不同。分子量約5.8kD。
?現(xiàn)代胰島素：通過重組DNA技術(shù)，利用大腸桿菌或酵母表達(dá)胰島素及其衍生物。
?美國(guó)主要:禮來(22%),諾華諾德 (44%),賽諾菲(33%),其他(1%),預(yù)計(jì)到2018年可達(dá)到320億美元的產(chǎn)值。
?國(guó)內(nèi)胰島素市場(chǎng)基本由諾華諾德、禮來、賽諾菲-安萬特三壟斷，牢牢把持95%的；國(guó)內(nèi)兩家胰島素公司：通化東寶，甘李藥業(yè)僅能分享剩余不到5%的市場(chǎng)。
胰島素種類
1 .Rapid-acting（超短效）: Humalog (Lispro), Novolog(Aspart), Apidra(Glulisine), for meals eaten at the sametime as the injection, used with long-acting type.
2 .Short-acting（短效）: Humulin (first recombinant Insulinproduct) or Novolin, Velosulin (for use in the insulinpump), 30-60 minutes within the eaten meal
3. Intermediate-acting（中效）: covers about half day orovernight, combined with rapid or short-acting.
4 .Long-acting（******）: covers about whole day, combinedwith rapid or short-acting.
5. Pre-mixed（預(yù)混）: combination of specific proportions ofintermediate-acting and short-acting insulin in one bottleor insulin pen (the numbers following the brａnd nameindicate the percentage of each type of insulin)
胰島素藥典要求
? USP-limit of HMW proteins– L20 packing, dihydropropane groups chemically bonded to poroussilica particles, 5 - 10 µm in diameter, 7.8 x 300 mm
–主要競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手:
? Waters Insulin HMWP HPLC, 10 µm, 7.8 x 300mm, BEH125 SEC, 1.7 µm, 4.6 x300 mm and 4.6 x 150 mm
? TSKgel Super SW2000 125 4 µm
? EP
– Column: 7.5 x 300 mm, hydrophilic silica gel for chromatography R (5-10 µm) with a pore size of 12-12.5 nm, of a grade suitable for theseparation of insulin monomer from dimer and polymers
?其他治療糖尿病藥物
– Glucagon-like peptide 1（胰高血糖素樣肽1） such as exenatide（艾塞那肽-禮來產(chǎn)品） where Zenix-C SEC-80 can be applied.
樣品介紹
1.賴脯胰島素（ Insulin Lispro，IL，商品名Humalog）為人胰島素（human insulin，HI）賴脯換位的重組類似物，是美國(guó)禮來公司于1996年******在瑞士上市的。顧名思義，此種賴脯換位重組胰島素類似物是指在HI分子結(jié)構(gòu)中，其B鏈C-末端28位上的與29位上的賴氨酸相互換位而成的。除上述兩個(gè)氨基酸換位以外，IL和HI的基本結(jié)構(gòu)******相同。
2.（human insulin，HI）購(gòu)自Sigma。
3.低精蛋白鋅
4.精蛋白生物合成人
5.精蛋白鋅
6.（批次1206511和1303235）
Pore size effect-insulin Lispro
Column:
ZenixTM-C SEC-80 (3 µm, 80 ?, 7.8 x 300 mm),
ZenixTM-C SEC-150 (3 µm, 150 ?, 7.8 x 300 mm)
phase: 0.1% Arginine:Acetonitrile:Acetic acid (65:20:15), Flow rate: 1 mL/min,
Detector: UV 276 nm, Column temperature: 37℃ ａnd 30℃, Injection volume: 10 µL,
Sample: Insulin Lispro 3.75 mg/mL in phosphate containing m-cresol
體積大小的影響–賴脯胰島素
色譜柱：
zenixtm-c sec-80（3µm，80?，4.6 x 300毫米），流速：0.35 mL/min，注射量：5µL
zenixtm-c sec-80（3µm，80?，7.8 x 300毫米），流速：1 mL/min，注射量：10µL
流動(dòng)相：0.1%：乙腈：乙酸（65:20:15），
檢測(cè)器：紫外276 nm，柱溫：30度，
示例：賴脯胰島素3.75毫克/毫升的磷酸鹽緩沖液中含有間甲酚，
柱溫賴脯胰島素
色譜柱柱：zenixtm-c sec-80（3µm，80?，7.8 x 300毫米）
流動(dòng)相：0.1%：乙腈：乙酸（65:20:15），流速：0.5毫升/分鐘，壓力：38巴
檢測(cè)器：紫外波長(zhǎng)276 nm，柱溫：37℃和30℃，注射量：10µL，
示例：賴脯胰島素3.75毫克/毫升的含磷酸鹽的間甲酚
流速的影響-賴脯胰島素
柱：zenixtm-c sec-80（3µm，80?，7.8 x 300毫米）
流動(dòng)相：0.1%：乙腈：乙酸（65:20:15），流速：0.5和1毫升/分鐘
檢測(cè)器：紫外波長(zhǎng)276 nm，柱溫：30℃，注射量：10µL，
示例：賴脯胰島素3.75毫克/毫升的含磷酸鹽的間甲酚
賴脯胰島素和胰島素的西格瑪
柱：zenixtm-c sec-80（3µm，80?，7.8 x 300毫米）
流動(dòng)相：0.1%：乙腈：乙酸（65:20:15），流速：1毫升/分鐘，壓力：103巴
檢測(cè)器：紫外波長(zhǎng)276 nm，柱溫：30℃，注射量：10µL，
示例：賴脯胰島素3.75毫克/毫升的含磷酸鹽的間甲酚，西格瑪胰島素3.8毫克/毫升，在0.01 N HCl
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