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雞D-2-羥基酸脫氫酶酶聯免疫分析試劑盒說明書

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雞D-2-羥基酸脫氫酶酶聯免疫分析試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD)水平。用純化的雞D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD),再與HRP標記的D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞D-2-羥基酸脫氫酶(D-2-HAD)濃度。 
標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,雞D-2-羥基酸脫氫酶酶聯免疫分析試劑盒靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒     *    英文名稱:    Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒    進口/分裝    英文名稱:    Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒    進口/原裝    英文名稱:    Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒     *    英文名稱:    Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T
雞D-2-羥基酸脫氫酶酶聯免疫分析試劑盒

 

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