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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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分析酶聯(lián)免疫人elisa免疫檢測(cè)試劑盒操作步驟

時(shí)間:2017/8/31閱讀:353
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酶聯(lián)免疫人elisa免疫檢測(cè)試劑盒操作步驟
1. 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2. 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4. 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準(zhǔn)備好的*抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有    明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯時(shí),即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)Z長(zhǎng)不要超過30分鐘)。
10. 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。
11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。
   人elisa免疫檢測(cè)試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)分析方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素, 已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)科研實(shí)驗(yàn)的各領(lǐng)域中。 本司產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于其他用途! 
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