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進(jìn)口elisa試劑盒酶標(biāo)抗體的活性鑒定和酶結(jié)合物的定量測(cè)定

閱讀:306發(fā)布時(shí)間:2017-4-11

1.進(jìn)口elisa試劑盒酶標(biāo)抗體的活性鑒定 一般以瓊脂擴(kuò)散和免疫電泳進(jìn)行鑒定。使酶標(biāo)抗體和相應(yīng)的抗原(抗原濃度為1mg/ml)產(chǎn)生沉淀線,洗滌后于底物溶液中顯色,顯色后用鹽水漂洗,沉淀線不褪色,說明酶和抗體都具有活性。良好的酶標(biāo)結(jié)合物瓊脂擴(kuò)散滴度一般應(yīng)在1:16以上。

2.進(jìn)口elisa試劑盒酶結(jié)合物的定量測(cè)定 包括酶量、IgG含量、酶與IgG克分子比值以及結(jié)合率的測(cè)定。

酶量(µg/ml)=OD403nm×0.42 

(1)戊二醛法:IgG(mg/ml)=(OD280nm-OD403nm×0.42)×0.94×0.62

(OD403×0.42為酶在403nm的光密度,抗體與酶-戊二醛結(jié)合后OD280nm約增加6%,所以乘以0.94校正。由于兔IgGOD280nm=1.0時(shí)為0.62mg,所以又乘以0.62)。

(2)過碘酸鈉法:IgG(mg/ml)=(OD280-OD403×0.30)×0.62

(3)進(jìn)口elisa試劑盒克分子比值=(酶ug/m) /40000/ 


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