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技術(shù)文章

ELISA實驗中樣本的收集方法

閱讀:433發(fā)布時間:2017-3-2

ELISA試劑盒在搜集標本前都必須有一個完整的方案,必須明白要檢查的成份是不是滿足安穩(wěn)。新鮮標本應盡早檢查,對搜集后當天就進行檢查的標本,應及時儲存在4℃?zhèn)溆?。如因特別原因需求定時、屢次搜集標本,請選材后,將標本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保留。因為蛋白樣品多不安穩(wěn),很容易降解,應防止重復凍融,以削減對試驗的影響。今日咱們和我們共享ELISA試驗中樣本的搜集辦法:

一、液體類標本,液體類標本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。
血漿:應根據(jù)標本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。
尿液:用無菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實施。
細胞培養(yǎng)上清:檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。檢查細胞內(nèi)的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml擺布。經(jīng)過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。
二、安排標本:采集標本后,稱取安排凈重,用液氮敏捷冷凍保留備用。標本消融后要保留在2-8℃的溫度,參加一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手藝或電動勻漿器將標本充沛勻漿。4℃離心(10000-15000轉(zhuǎn)/分)10-20分鐘。搜集上清,留取適當檢查,其他冷凍保留備用。

補白:假如樣本中的待檢物需求提純,請客戶自行處理。

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