ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫剖析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)的規(guī)范程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（capture Ab）固定在固相載體上，再參加一級(jí)檢測(cè)抗體（primarydetection Ab），構(gòu)成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。ELISA四種檢測(cè)法優(yōu)缺點(diǎn)比較如下：

1.直接法（direct ELISA） 

將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)略，因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。

缺陷：實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào)，但不是每種抗體都適合做符號(hào)，費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。

2.間接法（indirect ELISA） 

此測(cè)定辦法與直接法相似，不一樣在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào)，改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。

優(yōu)勢(shì)：二抗能夠加強(qiáng)信號(hào)，并且有多種挑選能做不一樣的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它zui多的免疫反響性。

缺陷：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。

3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA） 

被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量；或不符號(hào)，再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要當(dāng)心選擇，才可防止交互反響或競(jìng)爭(zhēng)一樣的抗原部位。

優(yōu)勢(shì)：高活絡(luò)、高專一性，抗原無(wú)須事前純化。

缺陷：抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體部位。

4.競(jìng)爭(zhēng)法（competitive ELISA） 

樣本里的抗原（自在抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競(jìng)爭(zhēng)一樣的抗體，當(dāng)樣品里的自在抗原越多，就能夠越多的抗體，而固定抗原就只能到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清潔過(guò)程，洗去自在抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來(lái)與只要固定抗原的對(duì)照組成果相比擬，依據(jù)呈色區(qū)別就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。

優(yōu)勢(shì)：可適用比擬不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

缺陷：全體的敏感性和專一性都較差。