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當(dāng)前位置:上海何亦儀器儀表有限公司>>技術(shù)文章>>真菌毒素的膠體金快速檢測(cè):原理與操作規(guī)范
將處理后的樣品檢測(cè)液滴入試紙卡樣品孔,液體會(huì)沿層析膜向檢測(cè)區(qū)擴(kuò)散;
檢測(cè)液中的真菌毒素會(huì)與金標(biāo)墊上的金標(biāo)抗體特異性結(jié)合,形成 “毒素 - 金標(biāo)抗體" 復(fù)合物;
陽性結(jié)果:若檢測(cè)液中毒素濃度高于檢出限,金標(biāo)抗體將全部與毒素結(jié)合,無法在檢測(cè)線(T 線)處與包被抗原結(jié)合,試紙僅出現(xiàn)質(zhì)控線(C 線),無可見 T 線;
陰性結(jié)果:若檢測(cè)液中毒素濃度低于檢出限,部分金標(biāo)抗體未與毒素結(jié)合,會(huì)在 T 線處與包被抗原結(jié)合,形成可見的紅色 T 線,同時(shí) C 線正常顯色(C 線顯色證明試紙有效)。
嘔吐毒素:≤100ng/mL
樣品處理:固體樣品(如糧食)取 2~5g 研磨均勻,按試劑盒要求加入提取液,振蕩 5~10 分鐘后靜置,取上清液作為檢測(cè)液;液體樣品可直接取上清或按比例稀釋后檢測(cè)。
加樣檢測(cè):將試紙卡平放,用滴管吸取檢測(cè)液,緩慢滴加 3~5 滴至樣品孔中。
結(jié)果觀察:室溫下靜置 10~15 分鐘(最長不超過 30 分鐘),在白色背景下觀察試紙條顯色情況,超過 30 分鐘的結(jié)果無效。
| 試紙顯色情況 | 結(jié)果判定 | 說明 |
|---|---|---|
| C 線顯色,T 線不顯色 | 陽性 | 樣品中毒素濃度≥檢出限,需送實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè) |
| C 線顯色,T 線顯色 | 陰性 | 樣品中毒素濃度<檢出限 |
| C 線不顯色(無論 T 線是否顯色) | 無效 | 試紙失效或操作不當(dāng),需重新檢測(cè) |
試紙卡需密封儲(chǔ)存于2~30℃陰涼干燥處,避免陽光直射、高溫高濕環(huán)境,使用前核對(duì)保質(zhì)期。
樣品處理需充分,固體樣品研磨要均勻,提取振蕩時(shí)間需達(dá)標(biāo),否則會(huì)導(dǎo)致毒素提取不充分,出現(xiàn)假陰性。
檢測(cè)液需澄清無雜質(zhì),若有渾濁需過濾后再使用,防止堵塞層析膜影響結(jié)果。
膠體金檢測(cè)僅為定性初篩,陽性樣品需送實(shí)驗(yàn)室采用高效液相色譜法等國標(biāo)方法進(jìn)行精準(zhǔn)定量
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