DNA或RNA鏈上堿基的苯環(huán)結(jié)構(gòu)在紫光區(qū)具有較強(qiáng)吸收，其吸收峰在260nm處。波長為260nm時(shí)，DNA或RNA的光密度OD260不僅與總含量有關(guān)，也隨構(gòu)型而有差異。
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品來說，濃度為1μg/ml時(shí)，DNA鈉鹽的OD260＝0.02。當(dāng)OD260＝1時(shí)，DNA濃度約為50μg/ml；RNA濃度約為40μg/ml；寡核苷酸濃度約為33μg/ml。
當(dāng)DNA樣品中含有蛋白質(zhì)、酚或其他小分子污染物時(shí)，會(huì)影響DNA吸光度的準(zhǔn)確測(cè)定。一般情況下同時(shí)檢測(cè)同一樣品的OD260、OD280和OD230，計(jì)算其比值來衡量樣品的純度。
核酸純度判定（經(jīng)驗(yàn)值）：
純DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白質(zhì)、酚等污染）
純RNA：1.7＜OD260/OD280＜2.0（＜1.7時(shí)表明有蛋白質(zhì)或酚污染；＞2.0時(shí)表明可能有異硫氰酸殘存）
計(jì)算待測(cè)樣品的濃度：
DNA樣品的濃度（μg/μl）：OD260×稀釋倍數(shù)×50/1000
RNA樣品的濃度（μg/μl）：OD260×稀釋倍數(shù)×40/1000
使用Biochrom分光光度計(jì)，設(shè)定參數(shù)后，可實(shí)現(xiàn)直接獲取核酸的濃度、OD260/OD280等多個(gè)數(shù)值，從而對(duì)樣品有一個(gè)全面的判定。
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