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乳糖肉湯培養(yǎng)基的配制方法

時(shí)間:2013/4/17閱讀:2351
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乳糖肉湯培養(yǎng)基配制方法:

 1.配料

配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調(diào)PH

用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

4.過(guò)濾

濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過(guò)150 ml培養(yǎng)基/250 ml的

三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250

ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。

乳糖肉湯培養(yǎng)基的保存條件:
培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,現(xiàn)在均改制成粉末。

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