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技術(shù)文章

沙門氏菌鑒定檢驗原始記錄

閱讀:76發(fā)布時間:2025-12-21


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*****預(yù)防控制中心
沙門氏菌鑒定檢驗原始記錄
記錄編號:WJ-027 第 1 頁 共 1 頁
受理編號
受檢單位
樣品名稱
檢驗依據(jù)
GB4789.4-2010《食品國家安全標(biāo)準(zhǔn)食品中衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗》
收樣日期
20
檢測儀器
HHB11-420型電熱恒溫培養(yǎng)箱(編號: 025)、3J0484型奧林巴斯顯微鏡(編號:032)、TN-100B型托盤式扭力天平(編號:001)
檢驗日期
20
檢測項目
沙門氏菌
1.前增菌:(20 日)
取檢樣 加入含BPW225mL的均質(zhì)杯中,以 r/min均質(zhì) min,轉(zhuǎn)入錐形瓶 ℃培養(yǎng) h
2.增菌:(20 日)
輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物,移取 1 mL,轉(zhuǎn)種于 10 mL TTB 內(nèi),于 ℃培養(yǎng) h。同時,另取 1 mL,轉(zhuǎn)種于 10 mL SC 內(nèi),于 ℃培養(yǎng) h;
3.分離:(20 日)
分別用接種環(huán)取增菌液 1 環(huán),劃線接種于一個 BS 瓊脂平板和一個 XLD 瓊脂平板。于 ℃分別培養(yǎng) h (XLD 瓊脂平板) h(BS瓊脂平板),觀察各個平板上生長的菌落,
BS上可疑菌落形態(tài):※菌落顏色:□黑色有金屬光澤□棕褐色□灰色□灰綠色
※周圍培養(yǎng)基:□呈黑色或棕色□不變□
※□其它:
XLD上可疑菌落形態(tài):□粉紅色□黃色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它:
4.生化試驗:(20 日)
自選擇性瓊脂平板上分別挑取 個典型或可疑菌落,接種三糖鐵瓊脂,先在斜面劃線,再于底層穿刺;接種針不要**,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基、蛋白胨水(供做靛基質(zhì)試驗)、尿素瓊脂 (pH7.2)、***(KCN)培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板,于 ℃培養(yǎng) ,將已挑菌落的平板儲存于室溫保留24 h,以備必要時復(fù)查。反應(yīng)結(jié)果見表1、表2,表3為補做試驗。h
表1在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果
三糖鐵瓊脂
賴氨酸脫羧酶試驗
培養(yǎng)基
初步判斷
斜面
底層
產(chǎn)氣
硫化氫
注:K:產(chǎn)堿,A:產(chǎn)酸;+:陽性,-:陰性;初步判斷:可疑沙門氏菌屬或非沙門氏菌。
2生化反應(yīng)初步鑒別表
硫化氫(H2S)
靛基質(zhì)
pH7.2尿素
***(KCN)
賴氨酸脫羧酶
反應(yīng)序號(判斷)
注:+陽性;-陰性;+/-陽性或陰性;反應(yīng)序號(判斷):A1、A2、A3或非沙門氏菌。
3補做試驗(選做)
ONPG
結(jié)果判斷
注:+:陽性,-:陰性;結(jié)果判斷:沙門氏菌或非沙門氏菌。
5.血清學(xué)鑒定:(20 日)
玻片上劃出2個約1cm×2cm的區(qū)域,挑取1環(huán)待測菌,各放1/2環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部,在其中一個區(qū)域下部加1滴多價菌體(O)抗血清,在另一區(qū)域下部加入1滴生理鹽水,作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1min,并對著黑暗背景進(jìn)行觀察。
血清凝集結(jié)果: (+或-)
7.結(jié)果:(20 日)
沙門氏菌。
檢驗者: 復(fù)核者: 檢畢日期:20

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