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關健詞:高溫 滅菌 記錄儀 RC-T200
高溫對微生物有明顯的致死作用。所以,應用高溫進行滅菌是比較確實可靠而且也是常用的物理方法。高溫可以滅活包括細菌及繁殖體、真菌、病毒和抵抗力zui強的細菌芽抱在內的一切微生物。
1 .高溫消毒或滅菌的機制
高溫殺滅微生物的基本機制是通過破壞微生物蛋白質、核酸的活性導致微生物的死亡。蛋白質構成微生物的結構蛋白和功能蛋白。結構蛋白主要包括構成微生物細胞壁、細胞膜和細胞漿內含物等.功能蛋白構成細菌的酶類。濕熱對細菌蛋白質的破壞機制是通過使蛋白質分子運動加速,互相撞擊,致使膚鏈連接的副鍵斷裂,使其分子由有規(guī)律的緊密結構變?yōu)闊o秩序的散漫結構,大量的疏水基暴露于分子表面,并互相結合成為較大的聚合體而凝固、沉淀,干熱滅菌主要通過熱對細菌細胞蛋白質的氧化作用,并不是蛋白質的凝固。因為干燥的蛋白質加熱到100 ℃ 也不會凝固。細菌在高溫下死亡加速是由于氧化速率增加的緣故。無論是干熱和濕熱對細菌和病毒的核酸均有破壞作用,加熱可使RNA 單鏈的磷酸二酯鍵斷裂;而單股DNA 的滅活是通過脫嘌呤。實驗證明,單股RNA 的敏感性高于單股的DNA 對熱的敏感性,但都隨溫度的升高而滅活速率加快。
2 .高溫消毒和滅菌的常用方法
方法主要分為干熱消毒滅菌和濕熱消毒滅菌.
( 1 )干熱消毒和滅菌法
?、?灼燒或焚燒消毒法灼燒是指直接用火焰滅菌,適用于籠具、地面、墻壁以及獸醫(yī)站使用的接種針、剪、刀、接種環(huán)等不怕熱的金屬器材,可立即殺死全部微生物。在沒有其他滅菌方法的情況下,對剖檢器械也可灼燒滅菌。接種針、環(huán)、棒以及剖檢器械等體積較小的物品可直接在酒精燈火焰上或點燃的酒精棉封火焰上直接灼燒,籠具、地面、墻壁的灼燒必須借助火焰消毒器進行。焚燒主要是對病畜尸體、垃圾、污染的雜草、地面和不可利用的物品器材采用燃燒的辦法,點燃或在焚燒爐內燒毀,從而消滅傳染源。體積較小,易燃的雜物等可直接點燃;體積較大,不易燃燒的病死畜禽尸體、污染的垃圾和糞便等可潑上汽油點燃,也可在焚燒爐或架在易燃的物品上焚燒。焚燒處理是zui為*的消毒方法。
?、?熱空氣滅菌法即在干燥的情況下,利用熱空氣滅菌的方法。此法適用于干燥的玻璃器皿,如燒杯、燒瓶、吸管、試管、離心管、培養(yǎng)皿、玻璃注射器、針頭、*、凡士林及液體石蠟等的滅菌。在干熱的情況下,由于熱的穿透力較低,滅菌時間較濕熱法長。干熱滅菌時,一般細菌的繁殖體在100 ℃ 經1.5 小時才能殺死,芽孢則需在140 ℃ 經3 小時才能被殺死。真菌的孢子100 ~115 ℃ 經1.5 小時才能殺死。干熱滅菌法是在特別的電熱干烤箱內進行的。滅菌時,將待滅菌的物品放入烘烤箱內,使溫度逐漸上升到160 ℃ 維持2 小時,可以殺死全部細菌及其芽孢。干熱滅菌時注意以下5 點。
middot; 消毒滅菌器械應洗凈后再放入電烤箱內,以防附著在器械上面的污物炭化。玻璃器材滅菌前應洗凈并干燥,勿與烤箱底壁直接接觸,滅菌結束后,應待烤箱溫度降至40 ℃ 以下再打開烤箱,以防滅菌器具炸裂。
?。锲钒b不宜過大,干烤物品體積不能超過烤箱容積的2 / 3 , 物品之間應留有空隙,有利于熱空氣流通。粉劑和油劑不宜太厚( 小于1.3 厘米),有利于熱的穿透。
?。蘅椘?、合成纖維、塑料制品、橡膠制品、導熱差的物品及其他在高溫下易損壞的物品,不可用干烤滅菌。滅菌過程中,高溫下不得中途打開烤箱,以免引燃滅菌物品。
?。疁缇鷷r間計算應從溫度達到要求時算起。
?。?2 )濕熱消毒和滅菌法濕熱滅菌法是滅菌效力較強的消毒方法,應用較為廣泛。常用的有如下幾種。
?、?煮沸消毒利用沸水的高溫作用殺滅病原體,是使用較早的消毒方法之一,方法簡單、方便、安全、經濟、實用、效果可靠。常用于針頭、金屬器械、工作服、工作帽等物品的消毒。煮時消毒溫度接近100 ℃ ,10 ~20 分鐘可以殺死所有細菌的繁殖體,若在水中加入5 % ~10 %的肥皂或堿或1 %的*,使溶液中pH值偏堿性,可使物品上的污物易于溶解,同時還可提高沸點,增強殺菌力。水中若加入2 %~5 %的石炭酸,能增強消毒效果,經15 分鐘的煮沸可殺死炭疽桿菌的芽孢。應用本法消毒時,要掌握消毒時間,一般以水沸騰時算起,煮沸20 分鐘左右,對于寄生蟲性病原體,消毒時間應加長。
② 流通蒸汽消毒又稱常壓蒸汽消毒,此法是利用蒸籠或流通蒸汽滅菌器進行消毒滅菌。一般在100 ℃ 加熱30 分鐘,可殺死細菌的繁殖體,但不能殺死芽孢和霉菌孢子,因此常在100 ℃ 30分鐘滅菌后,將消毒物品置于室溫下,待其芽孢萌發(fā),第二天、第三天再用同樣的方法進行處理和消毒。這樣連續(xù)3 天3 次處理,即可保證殺死全部細菌及其芽孢。這種連續(xù)流通蒸汽滅菌的方法,稱為間歇滅菌法。此消毒方法常用于易被高溫破壞的物品如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、牛乳培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基等的滅菌。若為了不破壞血清等,還可用較低一點溫度如70 ℃ 加熱1小時,連續(xù)6 次,也可達到滅菌的目的。
?、?巴氏消毒法此法常用于啤酒、葡萄酒、鮮牛奶等食品消毒以及血清、疫苗的消毒,主要是消毒怕高溫的物品。溫度一般控制在61 ~80 ℃ 。根據(jù)消毒物品性質確定消毒溫度,牛奶62.8 ~65.6 ℃ ,血清56 ℃ ,疫苗56 ~60 ℃ 。牛奶消毒,有低溫長時間巴氏消毒法(61 ~63 ℃ ,加熱30 分鐘),或高溫短時間巴氏消毒翻( 71 ~72 ℃ 加熱15 秒鐘),然后迅速冷卻至10 ℃ 左右。這可使牛奶中細菌總數(shù)減少90%以上,并殺死其中的全部病原菌
④ 高壓蒸汽滅菌通常情況下,1 個大氣壓100℃ ,當超過1 個大氣壓時,則水的沸點超過100℃,壓力越大,水的沸點越高。高壓滅菌就是根據(jù)這一原理,在一個密封的金屬容器內,通過加熱來增加蒸汽壓力、提高水蒸氣溫度,達到短時間滅菌的效果。
高壓蒸汽滅菌具有滅菌速度快,效果可靠的特點,常用于玻璃器皿、紗布、金屬器械、培養(yǎng)基、橡膠制品、生理鹽水、針具等消毒滅菌。
高壓蒸汽滅菌應注意如下幾點。
?。艃魷缇鲀壤淇諝?,排氣不充分易導致滅菌失敗。一般當壓力升至2 磅/平方英寸或3 磅/平方英寸時,緩緩打開氣門,排出滅菌器中的冷空氣,然后再關閉其門,使滅菌器內的壓力再度上升。
合理計算滅菌時間,要從壓力升到所需壓力時計算。
.消毒物品的包裝和容器要合適,不要過大、過緊,在否則不利于空氣穿透。
.注意安全操作,檢查各部件是否靈敏,控制加熱速度,防止空氣超高熱。
3 .影響的因素
?。?l )微生物方面
?、?微生物的類型由于不同的微生物具有不同的生物學與理化特性,故不同的微生物對熱的抵抗力不同,如嗜熱菌由于長期生活在較高的溫度條件下,故其對高溫的抵抗力較強:無芽孢細菌、真菌和細菌的繁殖體以及病毒對高溫抵抗力較弱,一般在60 ~70 ℃ 下短時間內即可死亡。細菌的芽孢和真菌的孢子均比其繁殖體耐高溫,細菌芽孢常??赡褪茌^長時間的煮沸,如肉毒梭菌孢子能耐受6 小時的煮沸:破傷風桿菌芽孢能耐受3 小時的煮沸。
?、?細菌的菌齡及發(fā)育時的溫度在對數(shù)生長期的細菌對熱的抵抗力相對較小,老齡菌的抵抗力較大。一般在zui適溫度下形成的芽孢比其在zui高或zui低溫度下產生的芽孢抵抗高溫的能力要大。如肉毒梭菌在24~ 37 ℃ 范圍內,隨著培養(yǎng)溫度的升高,其芽孢對熱的抵抗力逐漸加強,但在41 ℃ 時所形成的芽孢對熱的抵抗力較37 ℃ 時形成的芽孢的抵抗力為低。
?、?細菌的濃度細菌和芽孢在加熱時,并不是在同一時間內全部被殺滅,一般來說,細菌的濃度愈大,殺死zui后的細菌所需要的時間也愈長。
?。?2 )介質(水)的特性
水作為消毒殺菌的介質,在一定范圍內,其含量越多,殺菌所需要的溫度越低,這是由于水分具有良好的傳熱性能,能促進加熱時菌體蛋白的凝固,使細菌死亡。芽孢之所以耐熱,是由于它含水分比繁殖體要少。若水中加入2%~4%的石炭酸可增強殺菌力。細菌在非水的介質中比水作為介質時對熱的抵抗力大。如熱空氣條件下,殺菌所需溫度要高,時間要長。在濃糖和鹽溶液中細菌脫水,對熱的抵抗力增強。
( 3 )加熱的溫度和時間許多無芽孢桿菌(如傷寒桿菌、結核桿菌等)在62 ~63 ℃ 下,20~30 分鐘死亡。大多數(shù)病原微生繁殖體在60 ~70 ℃ 條件0.5 小時內死亡;一般細菌的繁殖100 ℃ 下數(shù)分鐘內死亡。
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