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抗體催化的化學反應及制備

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抗體催化的化學反應:由抗體催化的化學反應特異性高于酶,但催化速率低于常規(guī)的酶,只有l(wèi)0—10倍。但有一些未發(fā)現催化劑的反應,如Diels—Alder反應也能被抗體催化。常規(guī)酶一般不能催化胺鍵水解,抗體酶能使胺鍵水解的速度增加25萬倍。訖今為止,已發(fā)現和證明的由抗體催化的化學反應不下40種。
  

抗體催化的制備:抗體酶是抗原決定簇處于轉換態(tài)結構的抗體。因為轉換態(tài)分子極不穩(wěn)定無法制備抗體,所以催化性抗體的獲得主要是通過設計穩(wěn)定的轉換態(tài)的類似物作為半抗原,與載體蛋白交聯(lián)后,免疫動物,獲得針對半抗原的抗體,從中篩選具有催化活性的抗體。篩選催化性單克隆抗體所用的ELISA與篩選一般抗體的方法不*一樣,應根據催化反應的特點而進行適當的修改。經典的方法是先篩選出與底物或半抗原結合的抗體,然后從中再篩選出有催化活力的抗體,這種方法費時費力。利用催化性抗體對底物的催化活性,對底物進行適當修飾,使催化反應的產物可直接表現抗體的催化活性,這樣可以簡化檢測步驟。   
 

轉換態(tài)類似物半抗原的設計,必須了解催化反應的轉換態(tài)模型的結構特點。催化抗體的抗原結合位點上與轉換態(tài)互補的某些催化基團的形成,能穩(wěn)定轉換態(tài)分子。此外有人把單克隆抗體分子用化學修飾方法引入一些活性基團,提高催化性抗體的催化與親和效率。應用噬菌體抗體文庫也可以篩選催化性抗體,可省去制備轉換態(tài)類似物的復雜過程,直接用底物從文庫中篩選有催化活性的抗體片段。如用半抗原免疫后制備的文庫或文庫經過多次混雜重組,則可以得到更高的親和力的催化性抗體???型抗體也用于催化性抗體的制備,用酶作為抗原免疫小鼠獲得能夠封閉酶活性位點的單克隆抗體,將這個抗體用蛋白酶除去Fc片段,用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔,得到的抗體具有相應的酶催化活性。

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