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HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

閱讀：789發(fā)布時間：2023-8-14

HPV快檢MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

人乳頭瘤病毒（HPV）感染是婦女宮頸癌的主要病原體。2018年，約有31.1萬名婦女死于宮頸癌，其中85%以上的死亡發(fā)生在低收入和中等收入國家。使用一種簡單和快速的方法早期檢測HPV對于宮頸癌的治療作用極其重要，特別是在沒有專業(yè)設(shè)備的地區(qū)。

湯光輝博士課題組使用安普未來MIRA技術(shù)發(fā)布了兩篇科研文章，針對HPV的檢測分別開發(fā)出膠體金試紙條檢測和熒光檢測兩種簡單、快速的診斷方法。

使用MIRA技術(shù)結(jié)合CRISPR-Cas12a對13種高危人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測開發(fā)了簡單快速診斷方法-比色讀數(shù)與橫向流動TESTOR，在《Bioactive Materials》期刊做了“An enhanced method for nucleic acid detection with CRISPR-Cas12a using phosphorothioate modified primers and optimized gold-nanopaticle strip"文章發(fā)表，影響因子16.874。

HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

用磷酸修飾引物，設(shè)計crRNA，當(dāng)37℃反應(yīng)條件中，MIRA與Cas12a組分在同一反應(yīng)體系內(nèi)，首先啟動MIRA擴(kuò)增，擴(kuò)增后的靶序列隨后被Cas12a-crRNA進(jìn)行識別。crRNA與靶點(diǎn)結(jié)合激活Cas12a的內(nèi)切酶活性，并開始切割附近的報告探針，釋放熒光信號。

通過這些創(chuàng)新，將擴(kuò)增和檢測集成到一個單一的反應(yīng)系統(tǒng)中，封閉環(huán)境中完成檢測，避免了脫蓋容易導(dǎo)致的假陽性和氣溶膠風(fēng)險，同時可對此開發(fā)便攜式檢測盒。

HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

（TESTOR工作流程示意圖）

HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

（檢測13種HR-HPVs）

并且實(shí)驗中使用了HPV16和HPV18的臨床樣本驗證了該方法的檢測性能，TESTOR檢測與qPCR檢測的陽性和陰性一致性均為99%。

（臨床樣本檢測）

TESTOR檢測能夠在不同的環(huán)境中進(jìn)行測試，如機(jī)場、診所、當(dāng)?shù)厣鐓^(qū)和其他地點(diǎn)。

（上述信息均來源于文章：

/science/article/pii/S2452199X21002255）點(diǎn)擊底部閱讀原文，即可查閱原文

發(fā)表在《Scientific Reports》期刊的“A simple and rapid diagnostic method for 13 types of high?risk human papillomavirus (HR?HPV) detection using CRISPR?Cas12a technology"研究中，提出了一種使用MIRA技術(shù)結(jié)合CRISPR-Cas12a對13種HR-HPVs進(jìn)行非基因分型檢測的方法，通過該方法可以清楚地識別HR-HPVs個體的感染狀態(tài)，這是在單個反應(yīng)中實(shí)現(xiàn)多個HPV檢測的個報告。