此次實驗是用上海奧析UV1700PC這款紫外可見分光光度計來測鐵離子含量
先了解下分光光度法測定物質(zhì)含量時應(yīng)注意的事項，1是顯色反應(yīng)的條件2是測量吸光度的條件。顯色反應(yīng)的條件有：顯色劑的用量 、顯色時間、干擾物質(zhì)的消除方法、介質(zhì)的酸度、顯色時溶液的溫度等。測量吸光度的條件包括應(yīng)選擇的入射光波長，吸光度范圍和參比溶液等。
紫外分光光度計法測定微量鐵的顯色劑可以選擇鄰二氮菲(phen)在pH=2～9的條件下，Fe2+離子與鄰二氮菲生成穩(wěn)定的橘紅色絡(luò)合物，反應(yīng)如下：
(橘紅色)
此絡(luò)合物lgK穩(wěn)=21.3，摩爾吸光系數(shù)。
顯色前，要用鹽酸羥胺把Fe3+離子還原為Fe2+離子，反應(yīng)如下：
測定時應(yīng)控制溶液酸度在pH=5左右為宜，酸度太高，反應(yīng)進行較慢，酸度太低，Fe2+離子水解，影響顯色。
試劑和儀器
試劑 1. 100鐵標準溶液
2. 10鐵標準溶液由100稀釋制得
3.鹽酸羥胺10%溶液 4.鄰二氮菲溶液0.15% 5.NaAc溶液1mol/L
儀器 此次選擇UV1700PC紫外可見分光光度計（1cm比色皿）、50ml容量瓶若干
實驗步驟
1.測量波長的選擇
在50ml容量瓶中按次序準確加入以下溶液，10鐵標準溶液5ml，10%鹽酸羥胺1ml，搖勻，再加入1mol/LNaAc溶液5ml，0.15%鄰二氮菲3ml。用水稀釋至刻度。在分光光度計上，用1cm比色皿以水為參比溶液，測定其在440～580nm之間的吸光度。并繪制圖，從曲線上找出zui大吸收的波長。
2.顯色劑用量的選擇
取7個50ml容量瓶，各加入1ml10鐵標準溶液，1ml鹽酸羥胺，搖勻。再分別加入0.10、0.30、0.50、0.80、1.0、2.0、4.0ml鄰二氮菲和5mlNaAc溶液，以水稀釋至刻度，搖勻，放置10min。以水為參比溶液，在選擇的波長下測定各溶液的吸光度。并繪制,從曲線上找出顯色及的適宜用量V。
3.顯色時間的選擇
在1個50ml容量瓶中，加入1ml10鐵標準溶液，1ml鹽酸羥胺，再加入由上述選擇的適宜鄰二氮菲Vml，5mlNaAc，以水稀釋至刻度，搖勻。立刻用比色皿以水為參比在選擇的波長下測量吸光度。然后依次測定放置5、10、30、60min后的吸光度。繪制圖，選出與鄰二氮菲顯色反應(yīng)所需的適宜時間。
4.標準曲線的繪制
在6個50ml容量瓶中，分別加入0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml 10鐵標準溶液，再分別加入1ml鹽酸羥胺，2ml鄰二氮菲，5mlNaAc溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。以水為參比溶液在選擇的波長 、選擇的適宜顯色劑用量、適宜顯色時間下測定各溶液的吸光度。繪制標準曲線圖。
數(shù)據(jù)記錄與處理
1.測量波長的選擇
波長/nm | 440 | 460 | 480 | 490 | 500 | 505 | 510 |
吸光度/A | 0.139 | 0.156 | 0.175 | 0.178 | 0.185 | 0.190 | 0.192 |
波長/nm | 515 | 520 | 530 | 540 | 560 | 580 | |
吸光度/A | 0.189 | 0.180 | 0.143 | 0.094 | 0.033 | 0.01 | |
對上表中數(shù)據(jù)作圖，如下
由上圖知，zui適宜波長為=510nm
2.顯色劑用量的選擇
顯色劑體積V/mL | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.8 | 1.0 | 2.0 | 4.0 |
吸光度/A | 0.044 | 0.048 | 0.048 | 0.043 | 0.055 | 0.048 | 0.054 |
對上表中數(shù)據(jù)作圖，如下
由上圖知，zui適宜指示劑用量為V=1.0ml
3.顯色時間的選擇
顯色時間t/min | 2 | 5 | 10 | 30 |
吸光度/A | 0.055 | 0.056 | 0.056 | 0.058 |
對上表中數(shù)據(jù)作圖，如下
由上述圖知，直線斜率K=1.0×10-4≈0，故可認為顯色時間對吸光度幾乎無影響。
4.標準曲線的繪制
鐵標準溶液體積v/mL | 2.0 | 4.0 | 6.0 | 8.0 | 10.0 | 待測 |
鐵標準溶液濃度b/ | 0.4 | 0.8 | 1.2 | 1.6 | 2.0 | 待測 |
吸光度/A | 0.096 | 0.175 | 0.239 | 0.313 | 0.383 | 0.281 |
