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技術(shù)文章

手持ATP熒光檢測儀的使用方法

閱讀:20發(fā)布時(shí)間:2026-7-23

ATP(Adenosine Triphosphate),中文名為腺嘌呤核苷三磷酸,又叫三磷酸腺苷。它普遍存在于細(xì)菌等微生物細(xì)胞內(nèi),ATP是微生物新陳代謝的能量物質(zhì)。ATP生物發(fā)光法是利用ATP試劑中若干組分如熒光素-熒光素酶等與被測樣本反應(yīng)產(chǎn)生光子,再利用專門研制的熒光檢測儀來捕捉和檢測發(fā)光值,由于被測樣本所含細(xì)菌等微生物的數(shù)量與所含的ATP值、以及ATP值與發(fā)光值之間存在一定的函數(shù)關(guān)系,因此通過檢測發(fā)光值即能得到被測標(biāo)本所含細(xì)菌等微生物含量。

國內(nèi)外ATP儀器

手持ATP儀比臺式ATP儀更適合現(xiàn)場快速檢測

為了滿足現(xiàn)場快速檢測的需求,ATP熒光檢測儀宜選擇手持ATP熒光檢測儀(也叫手持式ATP熒光檢測儀),而實(shí)現(xiàn)流動(dòng)狀態(tài)即時(shí)檢測,因?yàn)楸M管大型的臺式ATP熒光檢測儀在靈敏度方面可能優(yōu)于手持式ATP儀,但它只能在實(shí)驗(yàn)室狀態(tài)下使用,不利于餐飲服務(wù)、醫(yī)療感控等流動(dòng)場所現(xiàn)場檢測。

ATP方法使用和評價(jià)

ATP熒光檢測法能在十幾秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)檢測,它大大提升了傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法24-48小時(shí)的工作效率,ATP方法的實(shí)現(xiàn)包括儀器、試劑和如何使用三大要素。

儀器

當(dāng)儀器和試劑配合使用,整體靈敏度達(dá)到10-10摩爾ATP范圍時(shí),可以用于 食品表明微生物檢測、手衛(wèi)生檢測、餐飲器具潔凈度檢測、重點(diǎn)科室和重要活動(dòng)場所(如會(huì)、世博會(huì)、人大政協(xié)會(huì)議等)物表檢測和衛(wèi)生安保、食品加工器具、工作臺等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結(jié)果檢測、醫(yī)療環(huán)境工作平臺(器械表面、內(nèi)窺鏡、空調(diào)進(jìn)出氣口)衛(wèi)生學(xué)即時(shí)評估,其實(shí)時(shí)監(jiān)測數(shù)據(jù)能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求;可用于更高要求的檢測如復(fù)用清洗效果后評估和二次清潔處理評價(jià)、醫(yī)療用水檢測等。當(dāng)然目前國外ATP設(shè)備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標(biāo)——可檢測到1O至10摩爾水平的ATP努力,檢測試劑也可達(dá)到5個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的水平。

試劑

專用的ATP試劑盒,必須是可去除游離ATP和體細(xì)胞ATP,只針對細(xì)菌細(xì)胞ATP檢測,所謂去除干擾物,這是基本要求。其次熒光素酶、蟲螢光素、裂解液、取樣拭子等組分設(shè)計(jì)成一體化,整體便于現(xiàn)場攜帶方便檢測使用,試想如果不是ATP試劑一體化拭子形式,而是各組分瓶瓶罐罐帶到現(xiàn)場臨時(shí)配制試劑如何能做到準(zhǔn)確性和現(xiàn)場快速檢測呢?

如何使用

取樣

是影響準(zhǔn)確性和一致性的關(guān)鍵之一,可按照<<醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)附錄A(規(guī)范性附錄)采樣及檢查方法>>等規(guī)范要求再參照手持式ATP儀說明書采樣、檢測、計(jì)算得出結(jié)果并記錄報(bào)告。采樣:(面積類)將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦個(gè)兩次(一只手涂擦面積約30cm2),并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣拭子。(體積類)將ATP拭子采樣棒一支在待測液體充分浸濕。檢測:將拭子放入手持ATP儀,獲得被測樣本與細(xì)菌污染程度相對應(yīng)的ATP生物熒光值,得出菌落數(shù)指標(biāo)(詳見下文操作步驟及定標(biāo)評價(jià))。

結(jié)果判讀

以上取樣、檢測全過程在1分鐘之內(nèi)快速完成,比起24-48小時(shí)的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)勢巨大。細(xì)菌數(shù)量與細(xì)菌內(nèi)所含ATP量有明確的相關(guān)性,通過檢測ATP含量可間接得出細(xì)菌數(shù)量,即ATP熒光檢測儀檢測結(jié)果顯示的發(fā)光值——相對照度單位RLU讀數(shù)與常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果菌落數(shù)CFU具有很高的相關(guān)性,兩者沒有統(tǒng)計(jì)上的顯著差異,因此這也是ATP熒光法細(xì)菌檢測的理論基礎(chǔ)。舉例來說,某食品加工廠上班前使用ATP檢測儀對生產(chǎn)工人進(jìn)行手衛(wèi)生檢測,檢測值<80RLU合格參考值時(shí),判定洗手消毒合格;檢測值≥80RLU合格參考值時(shí)判定洗手消毒不合格,需要重新洗手直至滿足規(guī)定的合格參考值才能上崗工作,合格參考值(如80)的確定需科學(xué)合理,不同應(yīng)用場合不建議規(guī)定統(tǒng)一的參考值,須根據(jù)不同品牌ATP熒光儀、ATP試劑、被測對象潔凈度不同要求等具體情況和對一定量的檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析來確定。


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