步驟1：預(yù)先打開培養(yǎng)箱的開關(guān)，設(shè)定溫度為20℃（要求培養(yǎng)箱恒溫變化范圍為±1℃）。
步驟2：將樣品加熱或冷卻至實驗溫度（通常為20℃），溫度波動范圍在±2℃以內(nèi)。
步驟3：曝氣1小時或攪拌半小時，使水樣溶解氧飽和（20℃左右）。
步驟4：必要時加入1mL B1試劑、3mL B2試劑，如需要可添加2mL硝化抑制劑。
步驟5：根據(jù)量筒準確測量預(yù)處理后pH值約為7.2的水樣。
步驟6：將水樣通過漏斗轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶中。
步驟7：將干凈的攪拌轉(zhuǎn)子放入培養(yǎng)瓶中。
步驟8：將干凈的密封杯放入培養(yǎng)瓶中。（為保證密封，可在密封杯的上下兩側(cè)涂抹適量的真空硅脂）。
步驟9：通過漏斗將 3/4 勺（約 0.6g）的CO2 吸收劑填充到密封杯中。
步驟10：擰緊培養(yǎng)瓶編號對應(yīng)的瓶蓋，將培養(yǎng)瓶依次放置在測定儀主機上。
步驟11：小心緩慢地將測定儀主機移入培養(yǎng)箱中，連接電源線，打開開關(guān)進行參數(shù)設(shè)置。
步驟12：實驗完成后，應(yīng)將培養(yǎng)瓶、密封杯和攪拌轉(zhuǎn)子清洗干凈并放置一旁待用。
注意：
1、預(yù)先估算待測樣品的BOD值。如果無法估算，可以借助化學(xué)需氧量（CODCr）進行計算。一般根據(jù)化學(xué)需氧量（CODCr）的70%的近似濃度范圍計算BOD的量。根據(jù)水樣的數(shù)量和8個培養(yǎng)瓶的數(shù)量，選擇要制備的平行樣品的數(shù)量。水樣必須經(jīng)過預(yù)處理，其PH值應(yīng)在7.2左右。
2、如果 CO2 吸收劑進入樣品，應(yīng)丟棄樣品并準備新樣品。注意每瓶均配密封蓋和管子，瓶蓋不能擰錯，否則數(shù)據(jù)與瓶內(nèi)水樣不對應(yīng)。
3、如果培養(yǎng)瓶中的轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動不好，輕輕搖晃瓶子使其轉(zhuǎn)動，但不要搖晃太多，以免CO2吸收劑進入入水樣中。
4、正常測量時，恒溫等待時間不能低于1小時，也不能高于3小時，否則會影響測量結(jié)果。環(huán)境溫度接近20℃時，選擇恒溫1小時，與20℃溫差較大時，可在該范圍內(nèi)適當延長恒溫等待時間。
5、數(shù)據(jù)處理，儀器可根據(jù)設(shè)定的采樣量直接讀取濃度。用戶只需對同一樣品的平行樣品取平均值，即可得到該水樣的BOD值。
6、清洗培養(yǎng)瓶、密封杯和轉(zhuǎn)子時，好的方法是用機械方法清除污垢，有條件的可以使用超聲波清洗機進行清洗。
