一、初始水溫控制
水溫對(duì)水中微生物生長(zhǎng)和生化耗氧率有很大影響：
因此，在整個(gè)測(cè)量過程中，水樣的溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在20℃±1℃，以保證測(cè)量結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度。
(1) 低溫水樣：
冬季采集的水樣、冷藏保存水樣和冷凍保存水樣的溫度遠(yuǎn)低于20℃，可以用溫度計(jì)控制，敞口放入在20℃恒溫水浴鍋中進(jìn)行快速升溫并達(dá)到平衡。當(dāng)水溫達(dá)到要求（20±1℃）時(shí)，重新測(cè)量以減少分析誤差。
(2)高溫水樣：
夏季采集水樣和加熱污染水樣的溫度往往高于20℃，可用溫度計(jì)控制，置于20℃恒溫生化培養(yǎng)箱中快速降溫并達(dá)到平衡。當(dāng)水溫達(dá)到要求（20±1℃）時(shí)，重新測(cè)量以減少分析誤差。
二、水樣的pH值調(diào)節(jié)
水中的大部分微生物都適合在中性或弱堿性（pH=7.2～7.6）的環(huán)境中生存。
如果磷酸鹽緩沖溶液用水稀釋，將無(wú)法達(dá)到足夠的緩沖效果。
首先用pH計(jì)或廣泛的pH試紙測(cè)試pH值，用鹽酸溶液[c(HCl)=0.5mol/L]或*溶液[c(NaOH)=0.5mol/L]調(diào)節(jié)水樣的pH值呈中性或弱堿性后稀釋。調(diào)節(jié)液的用量不應(yīng)超過水樣體積的0.5%，操作時(shí)注意不要引入氣泡。
如果水樣的酸度或堿度很高，可以用高濃度的堿液或酸液進(jìn)行中和。
三、水樣含鹽量調(diào)整
微生物分解有機(jī)物的生化反應(yīng)必須在營(yíng)養(yǎng)鹽充足的環(huán)境中進(jìn)行。
如果樣品含鹽量低，電導(dǎo)率小于125μs/cm，則可能因營(yíng)養(yǎng)鹽不足而影響微生物活性，從而影響水樣BOD5測(cè)定結(jié)果。
因此，測(cè)量前應(yīng)先用電導(dǎo)率儀檢測(cè)水樣的電導(dǎo)率，并在含鹽量低（電導(dǎo)率小于125μs/cm）的水樣中加入等體積的四種鹽溶液，水樣的電導(dǎo)率應(yīng)調(diào)整為 125μs/cm。
四、初始溶解氧調(diào)節(jié)
微生物分解有機(jī)物的生化反應(yīng)必須在好氧條件下進(jìn)行。溶解氧濃度影響反應(yīng)進(jìn)程。
測(cè)量前，必須嚴(yán)格控制水樣的初始溶解氧濃度。
①若水樣初始溶解氧濃度低于2.0mg/L：可采用稀釋或接種稀釋法提高水樣溶解氧濃度。（原因：未能為微生物的生理生化活動(dòng)提供足夠的溶解氧，使生化反應(yīng)難以進(jìn)行）。
②溶解氧過飽和：從水溫低的水域（冬季）或富營(yíng)養(yǎng)化湖泊、水庫(kù)采集的水樣中可能含有過飽和溶解氧。
測(cè)量前，通過初始水溫調(diào)節(jié)水樣，使水樣快速升溫至20℃，然后將所有水樣轉(zhuǎn)移至1000mL量筒中，然后搖動(dòng)量筒5 至 10 次以驅(qū)除過飽和溶解氧。否則會(huì)造成分析結(jié)果偏高（過飽和溶解氧會(huì)自行逸出而損失）。
③負(fù)值現(xiàn)象：
從水溫高的水域（夏季）或熱污染排放口采集水樣。在溶解氧濃度低的情況下，通過測(cè)量前的初始水溫調(diào)節(jié)水樣，使水樣快速冷卻至20℃，將水樣全部轉(zhuǎn)移至1000 mL量筒中，搖動(dòng)量筒5～10次，利用大氣復(fù)氧作用使其與空氣中氧分壓接近平衡。否則，會(huì)造成分析結(jié)果偏低甚至為負(fù)。
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