1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
葡萄糖-標(biāo)準(zhǔn)溶液：將葡萄糖（C6H12O6）和（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103℃干燥1小時后，各取150mg溶于稀釋水，加5-10mL接種液，然后用稀釋水稀釋至1000mL，混勻。
2、儀器校準(zhǔn)
取葡萄糖-標(biāo)準(zhǔn)溶液167mL，選擇0~400mg/L量程，按BOD5檢測步驟操作。檢測到的BOD濃度應(yīng)在180mg/L至230mg/L之間。否則需要檢查接種液或?qū)嶒炦^程是否有問題，儀器使用是否有問題。稀釋水應(yīng)預(yù)先保持20℃的恒溫，并曝氣或攪拌使溶解氧飽和。
3、注意事項
①裝瓶時水樣溫度為20℃左右。不要偏離太多。
②為保證水中的溶解氧含量，應(yīng)將水樣鼓泡曝氣1小時或置于敞口燒杯中用磁力攪拌器攪拌半小時以上，使水樣的溶解氧可以飽和。
影響bod測定儀測量的因素
1、溶解氧
由于測試溫度設(shè)定在20℃，冬季采集的樣品會出現(xiàn)溶解氧過飽和，夏季采集的樣品在20℃時可能會出現(xiàn)溶解氧欠飽和。因此，這些樣品應(yīng)在BOD5測定前進(jìn)行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調(diào)節(jié)至約20℃的飽和點。
2、PH值
測試水樣的pH值應(yīng)調(diào)整為6.7～7.5（pH 7.2）。BOD5讀數(shù)的下降可能是由于被測樣品的pH值超出此范圍。對于含有大量酸或堿的樣品，BOD5讀數(shù)可能低于實際含量。
酸性或堿性水樣應(yīng)用適當(dāng)濃度的*溶液或中和。所用調(diào)節(jié)溶液的體積不應(yīng)超過水樣體積的0.5%。如果超過，可以增加調(diào)理液的酸堿濃度，以減少調(diào)理液的體積。
3、溫度
實驗時將主機(jī)放置在20℃±１℃的培養(yǎng)箱中。BOD的測定也能超出這一溫度范圍，例如，有實驗證明在35℃測定BOD所需要的時間可以縮短為2.5天，其測定結(jié)果與五日20℃相似。提高溫度所獲得的BOD值與五日20℃條件下測定的結(jié)果有很好的相關(guān)性。
如果在采樣時樣品溫度超過20℃，或樣品溫度不足20℃，可將樣品放在培養(yǎng)箱中恒溫。在樣品測定前要求對樣品進(jìn)行處理。
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