目前分光光度法只能測量有顏色或具有吸光度的水質(zhì)樣品。如果被分析的水樣沒有顏色或吸光度值很小，那就需要水質(zhì)分析人員在被測樣品中加入能與被測物質(zhì)形成穩(wěn)定且具有顏色物質(zhì)的反應(yīng)試劑。而這個過程就叫做顯色反應(yīng)，這種試劑就叫做顯色試劑。另外，顯色反應(yīng)在分析時與顯色試劑有關(guān)，且與顯色的條件有關(guān)。
在水質(zhì)分析時選擇顯色反應(yīng)條件的主要目的是讓待測成分在選擇的反應(yīng)條件下，可以有效地轉(zhuǎn)化為適合光度分析的化合物。為了提高分析的靈敏度和準(zhǔn)確度，需要選擇合適的顯色劑用量、溶液酸度、顯色時間和溫度等。
分光光度法的顯色反應(yīng)條件
1、顯色劑的用量
在顯色反應(yīng)中一般都加入適當(dāng)過量的顯色劑，以使被測物質(zhì)盡可能轉(zhuǎn)化為有色化合物，但并非顯色劑加得越多越好，顯色劑過多，則會發(fā)生其他副反應(yīng)，對水質(zhì)的分析不利。在實際工作中應(yīng)該根據(jù)實驗要求常嚴(yán)格控制顯色劑的用量。
2、顯色溶液的酸度
有機(jī)顯色劑大部分是有機(jī)弱酸，溶液的酸度影響顯色劑的濃度以及本身的顏色。由于大部分金屬離子容易水解，酸度也會影響金屬離子的存在狀態(tài)，進(jìn)一步還會影響有色化合物的組成和穩(wěn)定性。因此，應(yīng)通過試驗確定出適當(dāng)?shù)乃岫确秶?，并在水質(zhì)分析過程中嚴(yán)格控制。
3、顯色反應(yīng)時間
有些顯色反應(yīng)能夠迅速完成且顏色穩(wěn)定；有些顯色反應(yīng)速率較慢，需放置一段時間，顏色才能穩(wěn)定。因此，應(yīng)該在顯色反應(yīng)完成后，顏色達(dá)到深度(即吸光度)且穩(wěn)定的時間范圍內(nèi)進(jìn)行分析。
4、顯色溫度
一般情況下，顯色反應(yīng)多在室溫下進(jìn)行，但有些顯色反應(yīng)需加熱到一定溫度才能完成。因此，不同的顯色反應(yīng)應(yīng)選擇適宜的顯色溫度，并應(yīng)注意控制溫度。
5、溶劑
溶劑的不同可能會影響顯色時間、有色化合物的離解度和顏色等。在分析時標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測溶液應(yīng)采用同一種溶劑。
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