慢性阻塞性肺病( chronic obstructive pulmonary disease，COPD) 是一種以氣流受限為主要特征的慢性肺部疾病。最初表現(xiàn)為用力時(shí)的呼吸困難。隨著病情加重，患者會(huì)在休息時(shí)也感到呼吸困難，嚴(yán)重時(shí)會(huì)威脅至患者生命。據(jù)報(bào)道，2015 年約有1. 75 億成年人患有 COPD，其中每年約有 320 萬人死于 COPD，是致死率排名第四的疾病。隨著環(huán)境污染的加劇和吸煙人口的增加，COPD 的患者數(shù)量仍在快速增長(zhǎng)，預(yù)計(jì)至 2030 年，致死率將上升至第三位。
1 儀器與材料
高效液相色譜系統(tǒng): 5410 紫外吸收檢測(cè)器、5310 色譜柱恒溫箱、5210 自動(dòng)進(jìn)樣器、5220 泵( 日立( 中國(guó)) 有限公司) ，Thermo BDS HYPEＲSIL C18色譜柱( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm，賽默飛世爾( 中國(guó)) 科技有限公司) ，F(xiàn)ＲITSCH6 型行星式球磨機(jī)( 德國(guó) Fritsch 公司) ，Büchi B 290 型Mini 噴霧干燥儀( 瑞士 Büchi 實(shí)驗(yàn)技術(shù)有限公司) ，F(xiàn)ＲESCO21 型冷凍離心機(jī)( 賽默飛世爾( 中國(guó)) 科技有限公司) ，渦旋儀( 海門市其林貝爾儀器制 造 有 限 公 司) ，MicroSprayer AerosolizerModel IA-1C、Dry Powder InsufflatorTM -Model DP4、Model LS-2-Ｒ( 美國(guó) Penn-Century 公司) 。布*( budesonide，BUD，湖北葛店人福藥業(yè)有限責(zé)任公司) ，普朗尼克( F68，巴斯夫中國(guó)有限公司) ，透明質(zhì)酸鈉( sodium hyaluronic，HA，含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥ 96. 8，重均分子質(zhì)量為 1470 ku，數(shù)均分子質(zhì)量為 703 ku，山東福瑞達(dá)生物醫(yī)藥有限公司) ，篩分乳糖( Ｒespitose SV003，荷蘭 DFEPharma 公司) ，布*粉吸入劑( pulmicort turbuhaler，瑞典 Astra Zeneca 公司) ，醋酸*( 武漢東康源科技有限公司) ，注射用生理鹽水( 色譜純，吉林省都邦藥業(yè)股份有限公司) ，烏拉坦( 分析純，天津市凱信化學(xué)公司) ，甲醇( 色譜純，天津市康科德科技有限公司) ，冰醋酸( 分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司) ，乙酸乙酯( 色譜純，山東禹王和天下新材料有限公司) 。健康 SD 大鼠 15 只，雄性，體質(zhì)量為 180 ～220 g，沈陽藥科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，質(zhì)量合格證號(hào): 211002300029072，使用許可證號(hào): SYXK( 遼)。
2 方法
2. 1 色譜條件
色譜柱: Thermo BDS HYPEＲSIL C18 ( 250 mm ×4. 6 mm，5 μm) ，流動(dòng)相: 甲醇 pH 3. 2 的醋酸水溶液( 體積比為 72∶ 28) ，流速: 1. 0 mL·min － 1，檢測(cè)波長(zhǎng): 254 nm，柱溫: 40 °C，進(jìn)樣量: 20 μL，內(nèi)標(biāo): 醋酸*。
2. 2 溶液的配制
2. 2. 1 布*儲(chǔ)備溶液
取布*對(duì)照品約 25. 0 mg，精密稱定，置于 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得質(zhì)量濃度為 500 mg·L － 1的布*儲(chǔ)備溶液。
2. 2. 2 布*系列標(biāo)準(zhǔn)溶液
分 別 精 密 量 取 2. 00、1. 00、0. 40、0. 20、0. 10 mL布*儲(chǔ)備溶液，置于 100 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得質(zhì)量濃度分別為10. 0、5. 0、2. 0、1. 0、0. 5 mg·L － 1的布*系列標(biāo)準(zhǔn) 溶 液。精 密 量 取 1. 00 mL 質(zhì) 量 濃 度 為2. 0 mg·L － 1的標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得質(zhì)量濃度為 0. 2 mg·L － 1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2. 2. 3 內(nèi)標(biāo)溶液
取醋酸*標(biāo)準(zhǔn)品約 10. 0 mg，精密稱定，置于 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得質(zhì)量濃度為 200 mg·L － 1的醋酸* 儲(chǔ) 備 溶 液。精 密 量 取 1. 00 mL 醋 酸 曲 安奈德儲(chǔ)備溶液，置于 50 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至 刻 度，搖 勻，即 得 內(nèi) 標(biāo) 溶 液 ( 質(zhì) 量 濃 度 為4. 0 mg·L － 1) 。
2. 3 肺組織樣品的處理
大鼠處死后迅速解剖，在氣管環(huán)節(jié)處將其剪斷，取出帶有完整氣管的肺組織( 此過程在5 min內(nèi)完成) ，生理鹽水洗去表面的，濾紙擦干，將肺葉鋪展于干燥的表面皿內(nèi)，用鈍器輕輕地對(duì)肺葉進(jìn)行密集的橫切操作，然后將肺泡從細(xì)支氣管慢慢刮下( 細(xì)支氣管有韌性，不易被切斷或刮斷) ，最后用分別將細(xì)支氣管、支氣管和氣管剪開，分離成氣管、支氣管、左細(xì)支氣管、右細(xì)支氣管、左肺泡、右肺泡6 個(gè)部分，于 － 20 °C 下冷凍保存，待處理。
3 討論
布*是一種具有局部抗炎作用的糖皮質(zhì)激素。用于 COPD 治療時(shí)，其主要的作用部位為末端細(xì)支氣管。因此，吸入的布*制劑最理想的狀態(tài)是能夠較多地沉積在末端細(xì)支氣管，利于其進(jìn)一步的發(fā)揮療效。本文作者將肺部組織分離成氣管、支氣管、左右細(xì)支氣管、左右肺泡等6 個(gè)部分，考察了 3 種處方的布*經(jīng)氣管內(nèi)給藥后在肺組織的分布。結(jié)果顯示，BUD-NEM在細(xì)支氣管分布最多，BUD-NC 次之，而 BUD-PT主要沉積在氣管、支氣管部位，在細(xì)支氣管分布最少。這可能是因?yàn)榕c市售藥相比，BUD-NEM 的空氣動(dòng)力學(xué)粒徑相對(duì)較小，大部分粒子能夠到達(dá)氣道深處，將更多的布*遞送至靶部位，同時(shí)，其黏附性可增加布*在靶部位的滯留時(shí)間，使其更好的發(fā)揮局部藥效。
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