1 材料與方法
1． 1 材料與試劑
有機(jī)磷水解酶( organophosphorus hydrolase，簡稱 OPH)(酶活性≥11 μmol /min·mg)，購自北京森根瑞亞公司;標(biāo)準(zhǔn)品( methyl parathion，簡稱 MEP;CAS 號(hào):298 － 00 － 0:購自天津一方恒益醫(yī)藥技術(shù)有限公司;*、*、氯化鈉、三、*、無水乙醇、*等，均購自天津市福晨化學(xué)試劑廠;4 － 硝基*，購自成都艾科達(dá)化學(xué)試劑有限公司;乙腈、丙酮(色譜純) 購自德國 Merck 公司。
1． 2 儀器與設(shè)備
主要的儀器有:Bio － rad 酶標(biāo)儀(美國伯樂)、Cp214 電子天平［奧豪斯儀器(上海) 有限公司制造］、pHS － 3C 酸度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公司)、YMDCY － 12S 水浴氮吹儀(上海育模儀器有限公司)、HH － W600 數(shù)顯恒溫三用水箱(金壇市朗博儀器制造有限公司);氣相色譜儀(帶氮磷檢測器，備有毛細(xì)管柱，美國 Thermo):TＲACE GC ULTＲA、ＲE － 52A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)、YDp － 02 型真空泵(上海育模儀器有限公司)、通風(fēng)柜(北京歐世佳實(shí)驗(yàn)室家具有限公司)、QL － 861 型旋渦混合器(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)、YDp － 02 型 真 空 泵 ( 上海育模儀器有限公司)、pHS － 3DW 型分析天平(上海儀電分析儀器有限公司)。
2 結(jié)果與分析
隨著 pH 值的升高，有機(jī)磷水解酶對(duì)的降解率不斷升高，當(dāng)pH 值為 8 時(shí)有機(jī)磷水解酶對(duì)的降解率達(dá)到，為 95． 55% ，隨著 pH 值的繼續(xù)上升，有機(jī)磷水解酶對(duì)的降解率逐漸下降。所以，選擇 pH 值為 8 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。有機(jī)磷水解酶對(duì)不同濃度進(jìn)行降解，在1 ～ 1 000 μg /mL 濃度范圍內(nèi)降解產(chǎn)物對(duì)硝基酚450 nm 下的吸光度與濃度呈線性關(guān)系，回歸相關(guān)系數(shù) r2 = 0． 999 1。
3 結(jié)果與討論
通過對(duì)有機(jī)磷水解酶降解條件進(jìn)行優(yōu)化，得出有機(jī)磷 水 解 酶 的 農(nóng) 藥 降 解 條 件: 酶 濃 度 為1 ∶ 1 000、pH 值為 8、降解溫度為 37 ℃、降解時(shí)間為10 min。通過氣相色譜法測得有機(jī)磷水解酶對(duì) 1、5、10 μg /mL 的降解率均達(dá)到 98% 以上，因此在生產(chǎn)中有機(jī)磷水解酶可作為針對(duì)甲基對(duì)硫磷的高效快速降解酶進(jìn)行推廣使用。另外，利用有機(jī)磷水解酶對(duì)具有高效降解特性，建立了一種簡便快速檢測水果、蔬菜中殘留量的新方法。
免責(zé)聲明：文章僅供學(xué)習(xí)和交流，如涉及作品版權(quán)問題需要我方刪除，請(qǐng)聯(lián)系我們，我們會(huì)在時(shí)間進(jìn)行處理。
會(huì)員1.png)