實(shí)驗(yàn)部分
TC-XP-G PCＲ 儀( 杭州博日科技有限公司) ; VOＲTEX-5 旋渦混合儀( 海門市其林貝爾儀器制造有限公司) ; FA2204B 電子天平( 杭平公司) ; S210 pH 計(jì)( 梅特勒-托利多儀器有限公司) ; CHI660E 電化學(xué)工作站( 上海辰華儀器有限公司) ; TGL-16G 高速離心機(jī)( 上海安亭科學(xué)儀器廠) ; Savant AA 石墨爐原子吸收分光光度計(jì)( 澳大利亞 GBC 科學(xué)儀器公司) 。三羥甲基氨基甲烷( Tris) 、巰基己醇( MCH) 、三-( 2-甲酰乙基) 膦鹽酸鹽( TCEP) ( Sigma-Aldrich 公司) ; K3［Fe( CN) 6］、KCl、NaCl、CdCl2、HgCl2、ZnCl2、CuCl2、FeCl2、Pb( Ac) 2、H2O2( 30%) 、濃 H2 SO4、無(wú)水乙醇、NaH2PO4、K2HPO4 ( 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司) 。所用試劑均為分析純; 實(shí)驗(yàn)用水為超純水( ≥18．3 MΩ·cm) 。
結(jié)果與討論
采用競(jìng)爭(zhēng)法實(shí)現(xiàn)響應(yīng)信號(hào)“Turn off"變化，發(fā)展了一種檢測(cè) Cd2+的電化學(xué)生物傳感器。5'端修飾巰基的 CDNA 通過(guò) AuS鍵固定在金電極上，隨后將適配體 Cd Apt 滴加到電極表面，與 CDNA 通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)，形成部分互補(bǔ)的雙鏈 DNA，剛性的雙鏈結(jié)構(gòu)可極大地增加電極表面直立狀態(tài) DNA 的數(shù)量。由于 Cd Apt 的 3'端修飾有 Fc，F(xiàn)c 靠近電極，引起高強(qiáng)度的信號(hào); 當(dāng) Cd2+存在時(shí)，Cd Apt 與 Cd2+發(fā)生特異性結(jié)合，破壞 DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)，使 Cd Apt 游離出來(lái)，修飾電極 Fc 的電流信號(hào)隨之減弱，使用 SWV 法通過(guò)檢測(cè)信號(hào)的變化實(shí)現(xiàn)對(duì) Cd2+的快速、靈敏檢測(cè)。相比于電極表面直接修飾適配體序列，利用競(jìng)爭(zhēng)法，靶分子與適配體結(jié)合，與互補(bǔ)序列分離，有利于增強(qiáng)電極表面電阻抗的變化程度，提高了靈敏度。
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