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固相萃取技術的優(yōu)缺點

閱讀:15發(fā)布時間:2025-9-8

固相萃取技術是一種樣品前處理方式,但目前該技術在國內市場的應用仍有限,這與使用方式和期望有關,也與技術本身的局限性有關。使用固相萃取技術時,一定要了解其優(yōu)點和缺點。



固相萃?。ê喎QSPE)技術,發(fā)展于20世紀70年代,由于其具有高效、可靠、消耗試劑少等優(yōu)點,在許多領域取代了傳統(tǒng)的液-液萃取而成為樣品前處理的有效手段。一些傳統(tǒng)的介紹SPE的書籍將其歸于液相色譜的原理,這其實是引起使用不當?shù)闹饕芍?。把SPE小柱看作一根液相色譜柱,不如把它看成單純的萃取劑更合適,因為液相色譜的重點在于分離,而SPE的重點在于萃取。



固相萃取技術在樣品處理中的作用分兩種:一是凈化,二是富集,這兩種作用可能同時存在。



固體萃取和液-液萃取相比,其優(yōu)點是操作方便和消耗試劑少,缺點是批次間的重復性難以保證。出現(xiàn)這種情況的原因在于:液體試劑的重復性好,只要其純度可靠,不同年代的產(chǎn)品的物理化學性質都是可靠的。而固體萃取劑就算保證了純度,還存在著顆粒度的差異,外形的差異等液體試劑不存在的且難以衡量的因素,不同年代不同批號的萃取劑性質可能會有較大的區(qū)別。



從理論上說,固相萃取應該在色譜分析的前處理上得到很好的應用:有機溶劑用得很少,可批量處理樣品,既可富集,又能除雜質,給人印象是前處理的革命性進步。然而現(xiàn)實情況是,至少在國內,雖然推廣了多年,實際應用還是相當有限。這與我們的使用方式和期望有關,也與它本身的局限有關。



固相萃取可以作為前處理手段的一個很好補充,但是在使用時,一定要明確其優(yōu)點和缺點,注意因地制宜,揚長避短。



SPE的應用優(yōu)勢



哪些分析任務的前處理適合使用固相萃取技術,即用固相萃取會比普通的溶劑萃取更理想,個人認為有以下幾種情況:



水中有機物的前處理



此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢在于以下幾方面:



可以定量地重復前處理過程



溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強度,動作,我們知道,每個人的振蕩動作是不同的,就是同一個人,也很難保證始終劃一的動作。所以說,溶液萃取的動作是不定量,不能重復的。



而在應用固相萃取時,比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復,可定量的。



現(xiàn)場處理



水中有機物的分析有一個長期困擾我們的瓶頸。有機物在池塘水庫等環(huán)境中能保持相對穩(wěn)定,但是一旦進入采樣瓶這個小環(huán)境中,就會迅速發(fā)生變化?,F(xiàn)場分析要求最多不能超過4 h,可一般的情況是,從取水回到實驗室的時間就遠遠不止4 h了,樣品發(fā)生了變化,分析結果的可靠性可想而知。



如果引入固相萃取技術,由于其設備簡單,體積小,易于攜帶,可以做到在現(xiàn)場一邊采樣,一邊進行前處理。采樣者帶回實驗室的是固相萃取柱,而不是水樣,這樣就能保證處理結果的可靠性。



從實際應用來說,在水的檢測中用固相萃取技術取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當多的工作需要摸索,目前尚不能取代,但是其發(fā)展的前景很值得看好。



減少有機試劑消耗量



在處理水樣時,如果用固相萃取,則只需要在洗脫時用到有機溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少得多。對于實驗者的人身保護和環(huán)境保護有著積極的意義。



批量生物材料的藥物成分萃取



這是固相萃取在實際應用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測血樣和尿樣時的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。



免疫親和固相萃取



萃取的理想狀態(tài)是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,最多做到“某一類"層次的萃取,而無法達到“某一種"層次的萃取。在固相萃取柱的基礎上加上免疫親和技術,可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達到理想的萃取效果。



實際困難在于雖然其理論很好,但是由于技術難度相對較高,可供應用的更少。



SPE的局限性



樣品局限性



固相萃取不適于處理固體樣品。對于固體,必須將其先制備為液體形態(tài)才能進行固相萃取操作,這一點就遠不如液體萃取了。



即使是液體樣品,固相萃取也有其額外的苛刻要求,即液體必須潔凈度高,不能有懸浮物或其他固體顆粒,否則會在柱前形成堵塞,無法繼續(xù)過柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體,液體樣品先經(jīng)過過濾。相比來說,溶劑萃取就不存在這個麻煩,略帶雜質也影響不大。



結構局限性



固相萃取柱的結構很簡單,除了塑料管,就只有篩板和填料。簡單的結構,雖然帶來了便利,也帶來了與生俱來的矛盾,一些在用溶劑萃取時永遠不會遇到的矛盾。



液面的問題



當進行活化、凈化,洗脫等典型的固相萃取操作時,會使用不同溶劑,這時的操作要求在液面下降到篩板時換加不同溶劑,加得太晚,會使填料中干涸產(chǎn)生氣泡,影響結果的穩(wěn)定性(甚至會因為溶液的張力問題而使液面無法下降)。相反,如果加得太晚,會使加入溶液和在篩板上的原有溶液混合,產(chǎn)生無法預料極性的新洗脫液,使結果的可靠性大打折扣。



加液加到篩板,說得容易做起來難,如果單獨做一個樣品可以緊盯液面操作。但是在批量操作時只會顧此失彼,固相萃取技術實用的一個重要意義就在于方便可靠地批量處理樣品,如果這個意義削弱的話,其實用性也就大大降低。



液面問題是制約固相萃取應用成功的主要瓶頸,雖隱蔽卻無法回避。解決的方法有兩種,一是干脆不用理會液面的困擾 ,每次都做到抽空溶液,這種做法倒是不會產(chǎn)生篩板上的溶液混合的問題,但是又會出現(xiàn)一個新的問題,即填料看起來是抽干了,但實際表面還是有數(shù)量不定的液體,每次干涸程度不一致,也無法重復。另一種解決方法就是在使用固相萃取器時用電導探針測試,這個方法比較精確,但是也有一個新的問題,探針需要清洗,否則會有交叉污染的可能,而且有這類裝置的固相萃取器價格一般相當昂貴。且一個探針在同一時間只能探測一個樣品管,要同時監(jiān)測一批小柱則很困難。



填料的裝填松緊問題



用液體萃取時我們從來不用考慮整個溶劑的密度是否均勻,但是對于固體填料,卻不能忽略這個問題。在同一批次甚至同一包里的幾個小柱,加上相同溶液時,我們會發(fā)現(xiàn)液體過柱的速度是不均勻的 ,總是有快有慢。



由于生產(chǎn)工藝和成本的綜合考慮,固相萃取小柱不可能采用類似填充液相色譜柱的勻漿高壓法,所以填料的裝填松緊不均勻是必然的。這就造成一個問題,由于液體流過的速度不一樣,每次加液的時間也會不一樣,不利于同步批次處理樣品,而且回收率也會不同??催^一些公司的所謂全自動固相萃取器,其原理都有一個假設,即每根小柱的流過速度應該一致,可惜,這只是“假"的設想。



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