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藍(lán)景科信河北生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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HaloTag pull-down技術(shù)介紹

時(shí)間:2025/9/8閱讀:1058
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蛋白Pull down技術(shù)將目標(biāo)蛋白進(jìn)行體外原核表達(dá),使標(biāo)簽蛋白(Halo、GST、His等)與目標(biāo)蛋白融合表達(dá),可以不受抗體、物種限制僅借助標(biāo)簽的親和介質(zhì)將目標(biāo)蛋白純化出來,目標(biāo)蛋白在純化過程中可以將與其能夠發(fā)生作用的蛋白“下拉"下來,進(jìn)而利用蛋膠、Western Blot或者質(zhì)譜鑒定拉下來的蛋白質(zhì),這些蛋白即與目標(biāo)蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down實(shí)驗(yàn)還可以通過外源同時(shí)表達(dá)目標(biāo)蛋白和待測(cè)蛋白,利用Pull down點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的確定它們是否發(fā)生直接的相互作用,也可以僅表達(dá)蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域進(jìn)行蛋白Pull down,確定兩個(gè)蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。

本公司主要提供Halo/GST-tag pull down:Halo-tag pull down是使用體外真核表達(dá)系統(tǒng)來表達(dá)目的蛋白,表達(dá)的目的蛋白攜帶Halo標(biāo)簽;GST-tag pull down是使用大腸桿菌誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白,表達(dá)的目的蛋白攜帶GST標(biāo)簽,也可以利用其它標(biāo)簽蛋白進(jìn)行pull down實(shí)驗(yàn)。

技術(shù)優(yōu)勢(shì):

1、采用真核無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)蛋白可進(jìn)行翻譯后修飾,更接近體內(nèi)真實(shí)蛋白狀態(tài)。

2、無需轉(zhuǎn)化和鑒定,可直接表達(dá)目的蛋白,節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

3、蛋白表達(dá)成功率高,系統(tǒng)模擬真核細(xì)胞折疊環(huán)境、無活細(xì)胞內(nèi)空間擁擠限制,表達(dá)產(chǎn)物無包涵體。

送樣要求與交付周期

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技術(shù)流程:

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結(jié)果示例:

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