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白介素elisa試劑盒時(shí)需要注意這幾點(diǎn)

時(shí)間:2018/4/18閱讀:274
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白介素elisa試劑盒時(shí)需要注意這幾點(diǎn)
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
① 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
② 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
③ 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
④ 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF-C ELISA Kit    
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF-B ELISA Kit    
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF ELISA Kit    
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACE2 ELISA Kit    
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大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACEⅡ ELISA Kit    
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大鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ANGⅡ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACEⅠ ELISA Kit    
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大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    Ang-Ⅰ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒    ,英文名:    Ang1-7 ELISA Kit    
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大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒    ,英文名:    VIP ELISA Kit    
大鼠血管動(dòng)蛋白(AMOT)ELISA試劑盒    ,英文名:    AMOT ELISA Kit    
大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒    ,英文名:    BrdU ELISA Kit    
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒    ,英文名:    ASD ELISA Kit    
大鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒    ,英文名:    androgen ELISA Kit    
大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)ELISA試劑盒    ,英文名:    TMSB4X ELISA Kit    
大鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒    ,英文名:    TSLP ELISA Kit    
大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒    ,英文名:    TARC/CCL17 ELISA Kit    
大鼠胸腺表達(dá)趨化因子25(TECK/CCL25)ELISA試劑盒    ,英文名:    TECK/CCL25 ELISA Kit    
大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒    ,英文名:    SHBG ELISA Kit    
大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒    ,英文名:    Smad7 ELISA Kit    
大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒    ,英文名:    Smad1 ELISA Kit    
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒    ,英文名:    NN-T4 ELISA Kit    
大鼠鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA試劑盒    ,英文名:    Zn-MT ELISA Kit 白介素elisa試劑盒   

 

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