對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進(jìn)行梳理。常規(guī)熒光定量PCR的流程是：樣品采集-運(yùn)輸-樣品處理-核酸提取-反轉(zhuǎn)錄（RNA病毒）-擴(kuò)增-結(jié)果讀取。下面看看各個環(huán)節(jié)都可以使用哪些對照？

1、陽性對照和陰性對照

陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進(jìn)行了提取和擴(kuò)增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強(qiáng)調(diào)處理過程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。

2.擴(kuò)增對照

我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴(kuò)增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準(zhǔn)確的定義應(yīng)該是擴(kuò)增陽性對照和擴(kuò)增陰性對照。擴(kuò)增陽性對照含有陽性擴(kuò)增模板，擴(kuò)增陰性對照應(yīng)含有陰性擴(kuò)增模板（基質(zhì)核酸）。擴(kuò)增對照只能監(jiān)控每次擴(kuò)增過程中的擴(kuò)增系統(tǒng)是否正常，不能監(jiān)控采樣、提取和每份樣品的操作過程。如果是檢測RNA樣品的檢測試劑盒，其擴(kuò)增陽性對照使用質(zhì)粒，便無法監(jiān)控反轉(zhuǎn)錄過程。 

3、內(nèi)標(biāo)（Internal Control，IC）

內(nèi)標(biāo)是指在同一反應(yīng)管中與靶序列共同擴(kuò)增的一段非靶序列分子。內(nèi)標(biāo)有兩種形式，一種是使用天然樣品中含有的內(nèi)參基因作為內(nèi)標(biāo)，另一種是人工添加的內(nèi)標(biāo)。內(nèi)標(biāo)的最大特點是與靶序列共同擴(kuò)增，而其他的對照都是獨立擴(kuò)增。