凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)過程

時(shí)間：2022/6/10閱讀：358

凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)過程：

1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。

2.將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。

3.將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

4.用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。

5.打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓，開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出，這是正?，F(xiàn)象）。

6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。

7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

8.將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。

9.放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。

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