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影響ELISA試劑盒曲線問題的原因有哪些?

時(shí)間:2021/5/28閱讀:457
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       標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。我司技術(shù)人員在處理售后的問題中,有不少科研朋友咨詢曲線的問題,隨后我司技術(shù)人員將影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了如下總結(jié):

一、OD值不正常的可能原因是:

1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;

2、溫度控制不好,控制正確溫度;

3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間;

4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;

5、陽光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避;

6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm;

7、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體;

8、水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替。

二、白板的可能原因是:

1、洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液;

2、少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體。

三、無梯度可能原因是:

1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;

2、OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次;

3、人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板。

四 線性不好可能原因是:

OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次。

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