藻毒素β-N-甲氨基-L-并氨酸（BMAA）試劑盒

BMAA ELISA Test Kit

貨號：PN520040

1、概述

這個Abraxis藻毒素β-N-甲氨基-L-并氨酸（BMAA）試劑盒適用于定量檢測水樣中β-N-甲基氨基-L-并氨酸（BMAA）的含量。本試劑不適用于臨床診斷。

2、安全性說明

試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)溶液含有少量的BMAA。另外，底物溶液含有四甲基聯(lián)*，終止溶液含有稀硫酸。要避免皮膚和底物溶液、終止液接觸。如果不小心接觸的話請用清水沖洗。

3、儲存和穩(wěn)定性

這個檢測試劑盒應(yīng)該置于4–8°C保存。在使用前要提前拿出來回復(fù)到室溫（20-25°C）。在有效期內(nèi)都可以使用。

4、原理

這個檢測試劑盒是基于通過特異性抗體識別BMAA的直接競爭酶聯(lián)免疫反應(yīng)。當(dāng)樣品中含有β-N-甲基氨基-L-并氨酸時，并且BMAA-HRP類似物競爭兔抗BMAA的結(jié)合位點抗體在溶液中，然后將BMAA抗體與第二抗體（山羊抗兔）固定在微量滴定板的孔上。在洗滌步驟和加入底物溶液后，產(chǎn)生了一個顏色反應(yīng)。加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色；在450nm波長進(jìn)行檢測，樣品中的β-N-甲基氨基-L-并氨酸濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。

5、試劑盒的局限性和可能的交叉反應(yīng)

對在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機(jī)物和無機(jī)物已近作過檢測對此試劑盒并無干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能避免的。發(fā)現(xiàn)以下物質(zhì)的存在對BMAA試劑盒沒有顯著影響：硫酸錳和氧化鋁高達(dá)10,000ppm;氯化鈣可達(dá)1000PPM;磷酸鉀，硫酸鋅至100ppm;氯化銅，硫酸鈣，氟化鈉和硝酸鈉至多10ppm;氯化鈉max至1 ppm;胡敏酸和氯化鎂高達(dá)0.1 ppm;甲醇達(dá)1％;和海水高達(dá)10％。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤，比如：試劑盒保存條件不對、錯誤的加液順序、試劑的量沒有加準(zhǔn)確、孵育的時間太長或太短、孵育的溫度太高或太低。操作過程不易在強(qiáng)光下進(jìn)行。和其它檢測方法一樣對陽性結(jié)果要求通過其它傳統(tǒng)的方法來驗證。

6、測定的重要性

BMAA是由幾種類型的藍(lán)細(xì)菌產(chǎn)生的非蛋白質(zhì)氨基酸。當(dāng)攝入時，BMAA會破壞并最終破壞運動神經(jīng)元導(dǎo)致ALS患者出現(xiàn)相同類型的損傷，并引起脊髓神經(jīng)原纖維纏結(jié)臍帶和腦，類似于阿爾茨海默病中所見。那些遭受這種BMAA引起損害的人是歸類為患有肌側(cè)索硬化/帕金森綜合征癡呆綜合征（ALS/PDC）。癥狀ALS/PDC包括ALS的肌肉麻痹程度，帕金森病的肌肉僵硬程度和阿爾茨海默病癡呆并最終導(dǎo)致死亡。通過攝入受污染的飲用水或食物，人類可能會接觸BMAA。飲用水可能通過在飲用水源中產(chǎn)生BMAA的藍(lán)細(xì)菌的增殖而被BMAA污染,如湖泊和水庫。目前還不清楚水處理的各種方法是否能夠去除BMAA來自飲用水供應(yīng)。暴露也會攝入諸如蘇鐵種子等植物的食物，已知BMAA的藍(lán)細(xì)菌生活并因此污染植物及其種子，并通過植物攝入食用含有植物或藍(lán)藻的毒素的魚類或其他動物。這是一個例子,20世紀(jì)50年代關(guān)島出現(xiàn)了生物放大,當(dāng)時食用蘇鐵種子的果蝠被原籍查莫羅人食用引起ALS/PDC病例急劇增加，在關(guān)島被稱為“裂解物”。BMAA ELISA允許重復(fù)測定42個樣品的分析。少于1毫升的樣本是必需的。測試可以在大約2小時內(nèi)完成。

性能數(shù)據(jù)

靈敏度：BMAA（95％B/B 0）的定量限為約4ng/mL。 中間的測試（50％B/B 0）約為100ng/mL。確定更接近中間的校準(zhǔn)曲線給出最準(zhǔn)確的結(jié)果。樣品濃度可以針對需要下限的樣品進(jìn)行檢測（可根據(jù)要求從Abraxis獲得技術(shù)公告）。