接種操作前的滅菌方法與操作步驟！

接種操作前的滅菌方法與操作步驟！

一、持接種環(huán)的手勢(shì)

以拿筆或毛筆的手勢(shì)持接種環(huán)環(huán)柄，以手指固定住接種環(huán)柄，一手指和手腕的轉(zhuǎn)動(dòng)來控制接種環(huán)的運(yùn)動(dòng)。

二、接種環(huán)的灼燒

1、如果接種環(huán)上沾有液體或細(xì)菌，先將接種環(huán)的頭靠近火焰外焰但不要深入，要先將環(huán)上液體烤干，這樣做是為了防止液滴瞬間溫度升高飛濺污染周圍環(huán)境。

2、一般用右手豎直持接種柄（這里提到的接種柄是金屬材質(zhì)，外面套有一段硬質(zhì)耐熱型塑料或膠皮的手持部分），將接種環(huán)前段的圓環(huán)在火焰外焰中燒紅。

3、將接種柄略微傾斜，向左下方刺去，將接種環(huán)前段的金屬絲從頭至基部緩慢通過外焰至*燒紅。燒紅時(shí)需要注意接種環(huán)金屬絲不要碰到桌面，切不要灼燒手握的位置。

4、繼續(xù)向左下方移動(dòng)，慢慢調(diào)整角度，將接種柄在外焰上進(jìn)行灼燒。接種環(huán)沿原路返回，來回往復(fù)灼燒幾次。    

5、將金屬絲與接種柄的連接處，用酒精外焰灼燒滅菌。這個(gè)連接處由于螺絲紋路較多，表面并非平整光滑， 容易留存微生物，并且在接種操作中，這個(gè)部位一般都進(jìn)入試管或平皿內(nèi)，所以這個(gè)位置的灼燒非常重要。

6、連接處灼燒完以后，后再將金屬絲和接種環(huán)燒紅一次，退出火焰。

三、持平皿手勢(shì)

平皿的拿法分兩種：手指托法和手掌托法。

手指托法將平皿置于左手中指、無名指和小指上，然后左手食指和拇指分別扣住平皿的邊緣，用左手拇指開啟平皿蓋。手指托法適用于操作人員手比較大的情況。由于靠食指和拇指控制平皿蓋。因此開合平皿十分靈活。

手掌托法將平皿置于左手手掌上，左手食指、中指、無名指和小指的關(guān)節(jié)扣住平皿底的邊緣。然后用左手拇指將平皿蓋向上頂開。這種持平皿的方法適用于操作人員手比較小的情況。但是由于只靠拇指來開合平皿，因此平皿開口無法開的很大。

以上兩種持平皿的姿勢(shì)只是針對(duì)直徑9cm以下的平皿而言，對(duì)于更大直徑的平皿，例如直徑14cm的平皿。無法用一只手完成持平皿并開合的動(dòng)作，需要將平皿放在與酒精燈火焰等高的平臺(tái)上。然后用左手開合平皿。

四、移液管的使用

使用移液管時(shí)，嚴(yán)格禁止用口吸取液體。口吸液體會(huì)將待移取液體中的病原體吸到口中，十分危險(xiǎn)。許多與實(shí)驗(yàn)室有關(guān)的感染都是經(jīng)口吸入和食入危險(xiǎn)性物質(zhì)所造成的?？谖后w還會(huì)污染操作對(duì)象。盡管移液管末端塞有棉花，但是棉花塞并不能有效的過濾微生物。感染性顆粒仍有可能通過它被吸入，當(dāng)棉花塞塞的很緊時(shí)，吸取的時(shí)候可能要更用力，反而會(huì)導(dǎo)致棉花塞、氣溶膠甚至液體被吸出。所以一定要用吸耳球或機(jī)械吸氣裝置進(jìn)行吸取液體和液體轉(zhuǎn)接的操作。以吸耳球?yàn)槔唧w介紹移液管的移液操作，具體操作如圖。

1、點(diǎn)燃酒精燈。將盛有待移取液體的容器置于酒精燈火焰周圍10cm的距離以內(nèi)，打開容器。左手持已滅菌的移液管接近頂部的位置，左手拇指、中指和左左手無名指拿住一根已滅菌的移液管，左手食指自然打開，左手食指要處于其指肚能觸及移液管頂端的距離范圍內(nèi)。將移液管迅速插入容器液面以下，但不要觸及容器底部，右手持捏扁的吸耳球抵在移液管頂部開始吸取液體，控制吸耳球膨脹的速度，防止速度過快引起液體噴出。吸取液體的體積要大于所需的體積。拿開吸耳球，左手食指指肚迅速蓋在移液頂端，用力程度以管內(nèi)液體不流動(dòng)即可。

2、將移液管豎直拿好，微微調(diào)節(jié)左手食指，使移液管內(nèi)液面緩緩下降至所需的液體體積。注意以液面的凹面低處為準(zhǔn)。

3、右手取來盛液體的容器（如試管）。將移液管前端貼目標(biāo)容器壁。松開左手食指移液管內(nèi)液體自然流入容器內(nèi)。

五、移液器的使用

由于移液管使用不便且容易造成污染。因此在有條件的實(shí)驗(yàn)室通常使用移液器來移取液體。

移液器規(guī)范使用的重要性無論怎么強(qiáng)調(diào)都不過分。移液器的使用需要注意：移液器在用完之后，一定要調(diào)回至大量程處，避免移液器內(nèi)各組件長(zhǎng)時(shí)間處于彈力壓縮狀態(tài)，影響移液器的精準(zhǔn)程度，造成移液器使用壽命縮短甚至損壞；不管設(shè)定的液體體積是多少，通常移液器的按鈕有兩檔，吸液時(shí)按到檔，排液時(shí)按到底（第二檔）；在酒精燈火焰附近操作時(shí)避免火焰灼燒到移液器槍桿。移取液體后需保持槍頭向下。不得傾斜槍體導(dǎo)致液體倒流；移液器槍體內(nèi)部存在污染（除非是已滅菌的可滅菌移液器），用于接種時(shí)需引起注意。

六、火焰灼燒涂布棒

涂布棒在進(jìn)行平板涂布操作之前，需要經(jīng)過火焰灼燒滅菌。具體操作見下圖。

1、將涂布棒彎頭的一端浸入酒精，注意不可浸入的太深，手持部分不可浸入或沾上酒精。  

2、將涂布棒取出，至酒精不再下滴的時(shí)候置于酒精燈的外焰進(jìn)行灼燒。注意蘸后不要過度傾斜涂布棒防止酒精沿涂布棒的柄倒流引燃到手。

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